Shenzhen Wensidun Technology Co., Ltd.
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Kit d'essai de Trichothecenes (T2) ELISA pour le riz d'arachide d'alimentation 96 Wells/kit
1. Principe
Ce kit d'essai est basé sur l'immunoessai concurrentiel d'enzymes pour la détection de Trichothecenes (T2). L'antigène de accouplement est enduit d'un préenduisage sur les rayures micro-bien. Le Trichothecenes (T2) dans l'échantillon et les antigènes de accouplement enduits d'un préenduisage sur les rayures micro-bien concurrencent pour anti- les anticorps de Trichothecenes (T2). Après que l'addition du conjugué d'enzymes, le substrat de TMB soit ajoutée pour la coloration. La valeur de la densité optique (OD) de l'échantillon a une corrélation négative avec le Trichothecenes (T2) dans l'échantillon. Cette valeur est comparée à la courbe standard et les résidus de Trichothecenes (T2) est plus tard obtenus.
2. Spécifications techniques
Sensibilité : 0,05 ppb
La température d'incubateur : 25℃
Temps d'incubateur : 30min~15min
Limite de détection :
Alimentation, arachide, riz 3ppb
Taux de réaction croisée :
Trichothecenes (T2) 100%
Taux de récupération :
Alimentation, riz 90±25%
Arachide 85±25%
3. Composants
| 1 | Bandes micro-bien | 12 bandes avec 8 puits démontables pièce | |
| 2 | solution étalon 6× (1 ml chacun) | 0ppb | 0.05ppb |
| 0.15ppb | 0.45ppb | ||
| 1.35ppb | 4.05ppb | ||
| 3 | Conjugué d'enzymes | 7ml | chapeau rouge |
| 4 | Solution de fonctionnement d'anticorps | 7ml | chapeau bleu |
| 5 | Substrat A | 7ml | chapeau blanc |
| 6 | SubstrateB | 7ml | chapeau noir |
| 7 | Arrêtez la solution | 7ml | chapeau jaune |
| 8 | 20× a concentré le tampon de lavage | 15ml | chapeau blanc |
| 9 | 5× a concentré redissoudre la solution | 50ml*2 | chapeau transparent |
4. Matériaux requis mais non fournis
1) Équipement : ELISA Reader (450 nm/630nm), homogénisateur, dispositif trembleur, centrifugeuse, équilibre : 0.01g quantité sensible, dispositif d'azote-séchage, incubateur, pipettes graduées, imprimante
2) micropipettes : 20ml à canal unique | 200ml, 100ml | 1000ml, μl 30~300 multicanal
3) réactifs : Méthanol.
5. Traitement préparatoire d'échantillon
Instructions (les points suivants doivent être traités avant le traitement préparatoire)
1) seulement les astuces jetables peuvent être employées pour les expériences et les astuces doivent être changées une fois utilisées pour absorber différents réactifs ;
2) avant l'expérience, chaque ustensile expérimental doit être propre et devrait re-être nettoyé s'il y a lieu, afin d'éviter la contamination qui interfère les résultats expérimentaux.
Préparation de solution avant traitement préparatoire d'échantillon :
1) solution de Sampleredissolving
Employez 1 part (5X) de concentrer en redissolvant la solution et se dissoudre avec 4 parts de l'eau désionisée pour obtenir l'échantillon prêt à employer redissolvant la solution.
2) solution d'extrait- échantillon
Employez 1 part de méthanol et dissolvez avec 1 parts d'échantillon redissolvant la solution pour obtenir la solution prête à employer d'extrait- échantillon.
Préparation d'alimentation, arachide, échantillon de riz
1) La prise 1.0±0.05g grinded l'échantillon dans le tube à centrifuger 50ml, ajoutent la solution d'extrait- échantillon 5ml, la secousse pour 3min, centrifugeuse à au-dessus de 4000r/min à 20℃ pour la minute 10 ;
2) le surnageant de la prise 100ul (-couche), ajoutent l'échantillon 400ul redissolvant la solution, secouent à également ;
3) prennent 50μl pour examiner
Facteur de dilution : 25
6. Procédures d'ELISA
6,1 instructions
1) apportent des réactifs d'ELISA à la température ambiante (20 - °C) 25 avant emploi.
2) a mis des réactifs d'ELISA de nouveau au ℃ 2-8 juste après l'utilisation
3) la reproductibilité d'ELISA dans le processus d'analyse est dépend en grande partie de la cohérence du plat de lavage, l'opération de lavage correcte de plat est le point de programme de la détermination ELISA
4) dans tout le processus d'incubation de la température constante, évitez l'exposition à la lumière, joint le microplate avec la membrane de couverture.
6. 2 procédures d'opération
1) apportent le kit d'essai à la température ambiante (℃ 20-25) pour au moins la minute 30, notent que chaque réactif doit être secoué également avant emploi ;
2) a mis les bandes micro-bien exigées dans des cadres de plat. A rescellé le microplate inutilisé, stocké au ℃ 2-8, non congelé.
3) préparation de solution : prenez le tampon du lavage 15ml concentré par 20×, dissolvez avec de l'eau désionisé à 1h19 1 (tampon de lavage concentré par 20× de 1 part + 19 parts d'eau désionisée), ou préparez comme quantité requise.
4) numérotation : nombre les micro-puits selon les échantillons et la solution étalon ; chaque échantillon et solution étalon devraient être exécutés en double ; enregistrez leurs positions.
5) ajoutent la norme/échantillon : Ajoutez le µL 50 de l'échantillon ou la solution étalon dans les puits en double distincts, puis ajoutez le conjugué d'enzymes, 50 µL/well ; puis solution de fonctionnement d'anticorps, 50 µL/well. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement, joint le microplate à la membrane de couverture, incubez le °C at25 pour la minute 30 dans l'obscurité.
6) microplate de lavage : Ouvrez soigneusement le membrance de couverture, versent le liquide hors du microwell ; ajoutez 250 µL/well de tampon de lavage, lavez entièrement pendant 4-5 fois, 15-30 s chaque fois, puis sortez et agitez-vous pour sécher avec le papier absorbant. (Utilisez la lance inutilisée pour percer la bulle après sec)
7) coloration : ajoutez le µL 50 de la solution du substrat A puis solution de 50 µL B dans chaque puits. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement, °C de l'andincubate at25 pour 15minin l'obscurité pour la coloration.
8) détermination : additionnez 50 que le µL du arrêtent la solution dans chaque puits. Mélangez doucement en secouant le plat manuellement. Placez la longueur d'onde du lecteur de microplate à 450 nanomètre pour déterminer la valeur d'OD de chaque puits. (Recommandez de lire la valeur d'OD au 450/630 nanomètre à double longueur d'onde à moins de la minute 5).
7. Jugement de résultat
Il y a deux méthodes pour juger les résultats ; le premier est le jugement approximatif, alors que le deuxième est la détermination quantitative. Note que la valeur d'OD de l'échantillon a une corrélation négative avec le Trichothecenes (T2) dans l'échantillon
7,1 détermination qualitative
La gamme de concentration (ppb) peut être obtenue par comparé la valeur moyenne d'absorbance aux normes. Supposez que valeur d'absorbance de l'échantillon un est 0,3, l'échantillon deux est 1,0, et les normes sont : 0ppb de 2,243 ; 0.05ppb de 1,816 ; 0.15ppb de 1,415 ; 0.45ppb de 0,74 ; 1.35ppb de 0,313 ; 4.05ppb de 0,155. Alors la concentration de l'échantillon un est de l'ordre de 1.35ppb | 4.05ppb ; L'échantillon deux est 0.15ppb | 0.45ppb. La chaîne de concentration de Trichothecenes (T2) dans les échantillons peut être obtenue par multiplié par la dilution correspondante de l'échantillon.
7. analyse quantitative 2
Afin de calculer la concentration des échantillons, une courbe standard devrait être faite. Avant que la courbe standard soit faite, le concept de % d'absorbance devrait être de savoir.
Calcul de % d'absorbance :
| Pourcentage de valeur d'absorbance = | B | ×100% |
| B0 |
Valeur de la moyenne OD de B-the de l'échantillon ou de la solution étalon
Valeur de la moyenne OD de B0-the des 0 solutions étalons de ng/mL
La norme zéro est ainsi rendue égale à 100 % et les valeurs d'absorbance sont citées dans les pourcentages. Les valeurs ont calculé pour les normes sont entrées dans un système des coordonnées sur le papier de graphique semilogarithmic contre la la concentration de Trichothecenes (T2) [ng/mL]. La concentration de Trichothecenes (T2) dans ng/mL correspondant à l'absorbance de chaque échantillon peut être lue de la courbe d'étalonnage.
Un logiciel particulier pour l'analyse de résultat d'ELISA facilitera de doubles ou multiples déterminations. Si vous avez besoin, appelez svp pour demander.
8. Précautions
1) la température ambiante en-dessous du ℃ 25 ou la température des réactifs et des échantillons n'étant pas retourné à la température ambiante (℃ 20-25) mènera à une valeur standard plus basse d'OD.
2) la sécheresse du microplate dans le procédé de lavage sera accompagnée des situations comprenant les courbes standard non linéaires et la reproductibilité indésirable ; Continuez ainsi à la prochaine étape juste après le lavage.
3) mélange même avant d'ajouter tous les réactifs.
4) la solution d'arrêt est la solution acide sulfurique de 2 M, évitent d'entrer en contact avec la peau.
5) n'emploient pas le kit dépassant sa date d'échéance. L'utilisation des réactifs dilués ou frelatés des kits mènera aux variations de la sensibilité et des valeurs de détection d'OD. N'échangez pas les réactifs des kits de différents numéros de lot pour employer.
6) stockage : magasin au ℃ 2-8, non congelé. Mettez le microplate inutilisé dans un sac d'automatique-cachetage pour le resceller. La substance étalon et la couleur sans couleur anciennes est sensible à la lumière, et elles ne peuvent pas être directement exposées ainsi à la lumière.
7) jettent la solution de coloration avec n'importe quelle couleur qui indique la dégénérescence de cette solution. La valeur de détection (450/630nm) des 0 solutions étalons (0 ppb) de moins de 0,5 ((A450nm<0>
8) la température optima de réaction est 25℃, et les températures trop élevées ou si basses auront comme conséquence les variations de la sensibilité de détection et des valeurs d'OD.
9. Date de stockage et d'échéance
Stockage : magasin au ℃ 2-8, non congelé.
Date d'échéance : 12 mois ; la date de la production est sur la boîte.
Note : Si l'emballage sous vide du microplate a la fuite, il est encore valide pour employer, n'affectent pas le résultat d'essai, soit de détendre pour employer.
Q1 : Combien de temps prendra-t-il pour que vous transportiez-vous ?
A1 : Habituellement bateaux dans un délai de 7 jours ouvrables.
Q2 : Soutenez-vous OEM/ODM ?
A2 : peut être soutenu. Nous pouvons adapter aux besoins du client selon les vos besoins spécifiques et quantités spécifiques.
Q3 : Comment votre usine va-t-elle en termes de contrôle de qualité ?
A3 : Nous avons la certification ISO9001 et ISO13485 la certification, jusqu'ici tout le processus de fabrication, nous avons des règles standard, nous nous conformons au comportement et aux lois appropriés du gouvernement.
Q4 : Le service après-vente est-il garanti ?
A4 : Nous fournissons le service après-vente technique en ligne professionnel. Si le produit échoue pendant l'expérience, nous pouvons fournir
conseils linéaires par le téléphone, la vidéo et d'autres formes.
Q5 : Quelle est votre quantité d'ordre minimum ?
A5 : 1Kit.
Q6 : Quelle est la méthode de expédition ?
A6 : Il peut être embarqué par exprès (FEDEX, UPS, DHL, SME, etc.) ou par l'air et la terre. Confirmez svp avec nous avant de passer une commande.