Ce kit d'essai est basé sur l'immunoessai concurrentiel d'enzymes pour la détection de Zearalenone. L'antigène de accouplement est enduit d'un préenduisage sur les rayures micro-bien. Le Zearalenone dans l'échantillon et les antigènes de accouplement enduits d'un préenduisage sur les rayures micro-bien concurrencent pour anti- les anticorps de Zearalenone. Après que l'addition du conjugué d'enzymes, le substrat de TMB soit ajoutée pour la coloration. La valeur de la densité optique (OD) de l'échantillon a une corrélation négative avec le Zearalenone dans l'échantillon. Cette valeur est comparée à la courbe standard et les résidus de Zearalenone est plus tard obtenus.

2. Spécifications techniques

Sensibilité : 0,1 ppb
La température d'incubateur : 25℃
Temps d'incubateur : 30min~15min

Limite de détection :
Alimentation 10ppb
Riz, maïs, arachide 5ppb

Taux de réaction croisée :
Zearalenone 100%

Taux de récupération :
Alimentation, riz, arachide, maïs 100±30%

3. Composants

1	Bandes micro-bien	12 bandes avec 8 puits démontables pièce
2	solution étalon 6× (1 ml chacun)	0 ppb	0,1 ppb
		0,3 ppb	0,9 ppb
		ppb 2,7	ppb 8,1
3	Conjugué d'enzymes	7 ml	chapeau rouge
4	Solution de fonctionnement d'anticorps	7 ml	chapeau bleu
5	Substrat A	7 ml	chapeau blanc
6	SubstrateB	7 ml	chapeau noir
7	Arrêtez la solution	7 ml	chapeau jaune
8	20X a concentré le tampon de lavage	40 ml	chapeau blanc
9	2X a concentré redissoudre la solution	50 ml	chapeau transparent

4. Matériaux requis mais non fournis

1) Équipement : ELISA Reader (450 nm/630nm), homogénisateur, dispositif trembleur, centrifugeuse, équilibre : 0.01g quantité sensible, dispositif d'azote-séchage, incubateur, pipettes graduées, imprimante
2) micropipettes : 20l à canal unique | 200l, 100l | 1000l, μl 30~300 multicanal
3) réactifs : Méthanol, n-hexane.

5. Traitement préparatoire d'échantillon

Instructions (les points suivants doivent être traités avant le traitement préparatoire)
1) seulement les astuces jetables peuvent être employées pour les expériences et les astuces doivent être changées une fois utilisées pour absorber différents réactifs ;
2) avant l'expérience, chaque ustensile expérimental doit être propre et devrait re-être nettoyé s'il y a lieu, afin d'éviter la contamination qui interfère les résultats expérimentaux.

Préparation de solution avant traitement préparatoire d'échantillon :
No. 1 de solution : Prélevez redissoudre
Le 2×concentrated redissolvant la solution est dilué avec de l'eau désionisé au 1:1 (1part a concentré redissoudre la solution + l'eau désionisée par 1part), utilisé pour redissoudre d'échantillon.
No. 2 de solution : Solution d'extrait- échantillon
7 parts de méthanol + 3 parts de l'eau désionisée pour obtenir la solution prête à employer d'extrait- échantillon.

Préparation témoins
5,1 préparation d'échantillon d'alimentation
1) prennent 1.0±0.05g grinded l'échantillon d'alimentation dans le tube à centrifuger 50ml, ajoutent la solution d'extrait- échantillon 5ml ;
2) secousse complètement pour 3min (ou secouer à la main pour au-dessus de 5min), centrifugeuse à au-dessus de 4000r/min à 20℃ pour la minute 10 ;
3) le surnageant de la prise 50ul (-couche), ajoutent l'échantillon 950ul redissolvant, secouent à également ;
4) prennent 50μl pour examiner
Facteur de dilution : 100
Note : si la concentration de résidu de drogue dans l'échantillon est hors de gamme de courbe, l'échantillon peut être encore dilué pour l'essai (par exemple : prenez le surnageant 50ul (-couche) dans un nouveau tube à centrifuger, ajoutez 1450ul a désionisé l'eau, le facteur de dilution est 150).

5.2Preparation de maïs, échantillon de riz
1) prennent 1.0±0.05g grinded l'échantillon dans le tube à centrifuger 50ml ; ajoutez la solution d'extrait- échantillon 5ml ;
2) secousse complètement pour 3min (ou secouer à la main pour au-dessus de 5min), centrifugeuse à au-dessus de 4000r/min à 20℃ pour la minute 10 ;
3) le surnageant de la prise 100ul (-couche), ajoutent l'échantillon 900ul redissolvant, secouent à également ;
4) prennent 50μl pour examiner
Facteur de dilution : 50
Note : Si la concentration en résidu de drogue de l'échantillon est hors de gamme de courbe, l'échantillon peut être encore dilué pour l'essai (par exemple : prenez le surnageant 50ul (-couche) dans un nouveau tube à centrifuger, ajoutez l'eau désionisée par 950, le facteur de dilution est 100).

5.3Preparation d'échantillon d'arachide
1) prennent 1.0±0.05g grinded l'échantillon d'arachide dans le tube à centrifuger 50ml ; ajoutez la solution d'extrait- échantillon 5ml, puis ajoutez le n-hexane 4ml ;
2) secousse complètement pour 3min (ou secouer à la main pour au-dessus de 5min), centrifugeuse à au-dessus de 4000r/min à 20℃ pour la minute 10 ;
3) le liquide clair de -couche d'écart, prennent le liquide de la moyen-couche 100ul, ajoutent l'échantillon 900ul redissolvant, secouent à également ;
4) prennent 50μl pour examiner
Facteur de dilution : 50
Note : Si la concentration en résidu de drogue de l'échantillon est hors de gamme de courbe, l'échantillon peut être encore dilué pour l'essai (par exemple : prenez le liquide de la moyen-couche 50ul dans un nouveau tube à centrifuger, ajoutez l'eau désionisée par 950, le facteur de dilution est 100).

6. Procédures d'ELISA

6,1 instructions
1. apportez les réactifs d'ELISA à la température ambiante (20 - °C) 25 avant emploi.
2. mettez les réactifs d'ELISA de nouveau au ℃ 2-8 juste après l'utilisation
3. La reproductibilité d'ELISA dans le processus d'analyse est dépend en grande partie de la cohérence du plat de lavage, l'opération de lavage correcte de plat est le point de programme de la détermination ELISA
4. Dans tout le processus d'incubation de la température constante, évitez l'exposition à la lumière, joint le microplate avec la membrane de couverture.

6,2 procédures d'opération

1. Mettez le kit à la température ambiante (20-25°C) pendant au moins 30 minutes, notez que chaque réactif doit être secoué bien avant l'utilisation ;
2. endroit les bandes désirées de microwell dans le cadre de plat. Des microplates inutilisés devraient être rescellés et stockés à 2-8°C, non congelé.
3. préparation de solution : Prenez 40ml de 20× a concentré le tampon de lavage et le dissoudre dans l'eau désionisée à un rapport du 1h19 1 (1 part de tampon de lavage concentré par 20× + 19 parts de l'eau désionisée), ou prépare comme nécessaire.
4. numérotation : Numérotez les microwells selon les échantillons et les solutions étalons ; chaque échantillon et solution étalon devraient être faits en double ; enregistrez leurs positions.
5. ajoutez la norme/échantillon : Ajoutez le µL 50 de l'échantillon ou la solution étalon pour séparer de doubles puits, ajoutent alors le conjugué d'enzymes, 50 µL/well ; puis solution de fonctionnement d'anticorps, 50 µL/well. Mélangez doucement en secouant le plat à la main, le joint le microplate à un film de couverture, et incubez au °C 25 pour la minute 30 dans l'obscurité.
6. lavage le microplate : Ouvrez soigneusement le film de couverture et versez le liquide dans le microwell ; ajoutez 250 µL/well de tampon de lavage, lavez complètement 4-5 fois pour 15-30 s chaque fois, enlevez-alors les avec le papier absorbant Pat sec. (Piquez les bulles d'air avec une lance inutilisée après séchage)
7. développement de couleur : Ajoutez le µL 50 de la solution du substrat A à chaque puits, suivi du µL 50 de la solution B. Mix doucement de secouer le plat à la main et incubez pour la minute 15 au °C 25 dans l'obscurité pour la souillure.
8. analyse : Ajoutez le µL 50 de la solution d'arrêt à chaque puits. Mélangez doucement en secouant le plat à la main. Placez la longueur d'onde du lecteur de microplate à 450 nanomètre pour déterminer la valeur d'OD de chaque puits. (On lui recommande de lire des valeurs d'OD à de doubles longueurs d'onde 450/630 nanomètre d'ici 5 minutes).

7. Jugement de résultat

Il y a deux méthodes pour juger les résultats ; le premier est le jugement approximatif, alors que le deuxième est la détermination quantitative. Note que la valeur d'OD de l'échantillon a une corrélation négative avec le Zearalenone dans l'échantillon
7,1 détermination qualitative
La gamme de concentration (ppb) peut être obtenue par comparé la valeur moyenne d'absorbance aux normes. Supposez que valeur d'absorbance de l'échantillon un est 0,3, l'échantillon deux est 1,0, et les normes sont : 0ppb de 2,243 ; 0.1ppb de 1,816 ; 0.3ppb de 1,415 ; 0.9ppb de 0,74 ; 2.7ppb de 0,313 ; 8.1ppb de 0,155. Alors la concentration de l'échantillon un est de l'ordre de 2.7ppb | 8.1ppb ; L'échantillon deux est 0.3ppb | 0.9ppb. La chaîne de concentration de Zearalenone dans les échantillons peut être obtenue par multiplié par la dilution correspondante de l'échantillon.
7. analyse quantitative 2
Afin de calculer la concentration des échantillons, une courbe standard devrait être faite. Avant que la courbe standard soit faite, le concept de % d'absorbance devrait être de savoir.
Calcul de % d'absorbance :

Pourcentage de valeur d'absorbance =	B	×100%
	B0

Valeur de la moyenne OD de B-the de l'échantillon ou de la solution étalon
Valeur de la moyenne OD de B0-the des 0 solutions étalons de ng/mL
La norme zéro est ainsi rendue égale à 100 % et les valeurs d'absorbance sont citées dans les pourcentages. Les valeurs ont calculé pour les normes sont entrées dans un système des coordonnées sur le papier de graphique semilogarithmic contre la la concentration de Zearalenone [ng/mL]. La concentration de Zearalenone dans ng/ml correspondant à l'absorbance de chaque échantillon peut être lue de la courbe d'étalonnage.
Un logiciel particulier pour l'analyse de résultat d'ELISA facilitera de doubles ou multiples déterminations. Si vous avez besoin, appelez svp pour demander.

8. Précautions

1. La température ambiante en-dessous du ℃ 25 ou la température des réactifs et des échantillons n'étant pas retourné à la température ambiante (℃ 20-25) mènera à une valeur standard plus basse d'OD.
2. la sécheresse du microplate dans le procédé de lavage sera accompagnée des situations comprenant les courbes standard non linéaires et la reproductibilité indésirable ; Continuez ainsi à la prochaine étape juste après le lavage.
3. mélange même avant d'ajouter tous les réactifs.
4. La solution d'arrêt est la solution acide sulfurique de 2 M, évitent d'entrer en contact avec la peau.
5. N'employez pas le kit dépassant sa date d'échéance. L'utilisation des réactifs dilués ou frelatés des kits mènera aux variations de la sensibilité et des valeurs de détection d'OD. N'échangez pas les réactifs des kits de différents numéros de lot pour employer.
6. stockage : magasin au ℃ 2-8, non congelé. Mettez le microplate inutilisé dans un sac d'automatique-cachetage pour le resceller. La substance étalon et la couleur sans couleur anciennes est sensible à la lumière, et elles ne peuvent pas être directement exposées ainsi à la lumière.
7. jetez la solution de coloration avec n'importe quelle couleur qui indique la dégénérescence de cette solution. La valeur de détection (450/630nm) des 0 solutions étalons (0 ppb) de moins de 0,5 ((A450nm<0> 8. La température optima de réaction est le ℃ 25, et les températures trop élevées ou si basses auront comme conséquence les variations de la sensibilité de détection et des valeurs d'OD.

9. Date de stockage et d'échéance

Stockage : magasin au ℃ 2-8, non congelé.
Date d'échéance : 12 mois ; la date de la production est sur la boîte.
Note : Si l'emballage sous vide du microplate a la fuite, il est encore valide pour employer, n'affectent pas le résultat d'essai, soit de détendre pour employer.

Q1 : Quand sera-t-il embarqué ?
A1 : Nous embarquerons les marchandises pour vous dès que possible dans un délai de 7 jours ouvrables après réception du paiement. (En cas de facteurs externes tels que l'épidémie, la livraison peut être retardée)

Q2 : Soutient-il OEM/ODM ?
A2 : Il peut être soutenu, mais la quantité spécifique doit être plus de 100 000 morceaux, qui est commode pour les produits adaptés aux besoins du client.

Q3 : Comment votre usine va-t-elle en termes de contrôle de qualité ?
A3 : Nous avons nationalement certifié ISO9001 et ISO13485. Notre processus de fabrication se conforme aux procédures standard pour assurer la qualité du produit optima.

Q4 : Comment fournir le service après-vente ?
A4 : Nous fournissons le service après-vente technique en ligne professionnel. Nous pouvons te fournir des conseils faces à face par l'intermédiaire de la vidéo, du téléphone, etc.

Q5 : Quelle est la méthode de paiement ?
A5 : Nous recevons le paiement par T/T.

Q6 : Comment se transporter ?
A6 : Choisissez la meilleure méthode de expédition pour vous en obtenant des citations de nos beaucoup de transporteurs coopératifs, et également de bateau selon vos conditions.

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