Nitrofuranne SEM ELISA Food Safety Test Kit pour la sensibilité 0.02ppb 96Wells/Kit de lait

Nitrofuranne SEM ELISA Food Safety Test Kit pour la sensibilité 0.02ppb 96Wells/Kit de lait

1. Principe de SEM ELISA Food Safety Test Kit de nitrofuranne

Ce kit d'essai est basé sur l'immunoessai concurrentiel d'enzymes pour la détection du nitrofuranne (SEM) dans l'échantillon. Les antigènes de accouplement sont enduits d'un préenduisage sur les rayures micro-bien. Le nitrofuranne (SEM) dans l'échantillon et les antigènes de accouplement enduits d'un préenduisage sur les rayures micro-bien concurrencent pour les anticorps d'anti-SEM. Après que l'addition du conjugué d'enzymes, le substrat de TMB soit ajoutée pour la coloration. La valeur de la densité optique (OD) de l'échantillon a une corrélation négative avec SEM dans elle. Cette valeur est comparée à la courbe standard et la concentration de SEM est plus tard obtenue.

2. Spécifications techniques

Sensibilité : 0.02ppb

La température d'incubation : 25℃

Temps d'incubation : 30min~15min

Tissu de limite de détection, oeuf, miel : 0.1ppb

Taux de réaction croisée

SEM 100%

AMOZ < 0="">

AOZ < 0="">

AHD < 0="">

Taux de récupération

Tissu 75±25%

Miel 70±20%

Oeuf 95±25%

3. Composants de SEM ELISA Food Safety Test Kit de nitrofuranne

4. Matériaux requis mais non fournis

1) équipements : le lecteur de microplate, imprimante, homogénisateur, dispositif d'azote-séchage, vortex, centrifugeuse, mesurant introduit à la pipette, l'équilibre (une sensibilité réciproque de 0,01 g), incubateur, bain d'eau ;

2) Micropipettors : 20-200µL à canal unique, 100-1000µL, et 30~300µl multicanal ;

3) Réactifs : NaOH, acétate éthylique, n-hexane, HCI (36,5% approximatifs), K2HPO4·3H2O.

5. Traitement préparatoire d'échantillon

Instructions

Les points suivants doivent être traités avant le traitement préparatoire du genre d'échantillon :

1) Seulement les astuces jetables peuvent être employées pour les expériences et les astuces doivent être changées une fois utilisées pour absorber différents réactifs ;

2) Avant l'expérience, chaque équipement expérimental doit être propre et devrait re-être nettoyé s'il y a lieu, afin d'éviter la contamination qui interfère les résultats expérimentaux.

Préparation de solution avant traitement préparatoire d'échantillon :

1) 0,1 M K2HPO4 : dissolvez g 11,4 K2HPO4·3H2O dans l'eau désionisée à 500mL.

2) 1 M HCl : dissolvez 8.6mL HCI (36,5% approximatifs) dans l'eau désionisée à 100mL.

3) NaOH de 1 M : dissolvez NaOH 4g dans l'eau désionisée à 100mL.

4) le 2×concentrated redissolvant la solution est dilué avec de l'eau désionisé au 1:1 (1mL a concentré redissoudre la solution + l'eau désionisée par 1mL), utilisé pour redissoudre d'échantillon.

5,1 préparation témoins

a) Tissu, oeuf

1) Pesez 1± 0.05g de l'échantillon homogénéisé, ajoutez 4mL de l'eau distillée, 0.5mL 1 M HCI et 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) à chaque tube, secouent correctement pour 2min ;.

2) Incubez le ℃ at37 au-dessus de la nuit (heures approx16) ou incubez at56℃ par le bain d'eau (2 heures).

3) Ajoutez 5mL 0.1M K2HPO4, NaOH de 0.4mL 1M et 6mL l'acétate éthylique à chaque tube, secousse pour 30s.

4) Centrifugeuse à 4000r/min ci-dessus à la température ambiante (℃ 20-25) pour 10min (s'il y a d'émulsification ou la couche d'acétate éthylique n'est pas assez pour 3ml, n'incube pas l'échantillon au bain d'eau 80℃ pour 10min et centrifugeuse à plusieurs reprises ; ou augmentez la vitesse et prolongez la période de la centrifugeuse).

5) Transfert 3mL de la couche d'acétate éthylique dans un nouveau tube centrifuge et s'évaporer à sec par l'azote ou avion à 50℃.

6) Dissolvez les résidus secs en n-hexane 2mL, ajoutez 1mL de la solution redissolvante diluée, mélange correctement pendant 30 secondes, centrifugeuse à au-dessus de 4000 r/min à la température ambiante (℃ 20-25) pour la minute 10 ; Enlevez la phase de n-hexane de -couche (s'il y a d'émulsification, après élimination de la phase de n-hexane de -couche, incube l'échantillon au bain d'eau 70℃ pour 10-20min, le centrifuge à plusieurs reprises).

7) Prenez à 50 le µL du inférieur pour l'analyse.

Pli de la dilution de l'échantillon : 2

b) Miel

1) Pesez 2± 0.05g de l'échantillon homogénéisé (miel), ajoutez 4mL de l'eau distillée, 0.5mL 1 M HCI et 100 le µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) à chaque tube, secouent correctement pour 2min ;.

2) Incubez le ℃ at37 au-dessus de la nuit (heures approx16) ou incubez at56℃ par le bain d'eau (2 heures).

3) Ajoutez 5mL 0.1M K2HPO4, NaOH de 0.4mL 1M et 6mL l'acétate éthylique à chaque tube, secousse pour 30s.

4) Centrifugeuse à 4000r/min ci-dessus à la température ambiante (20-25℃) pour 10min (s'il y a d'émulsification ou la couche d'acétate éthylique n'est pas assez pour 3ml, n'incube pas l'échantillon au bain d'eau 80℃ pour 10min et centrifugeuse à plusieurs reprises ; ou augmentez la vitesse et prolongez la période de la centrifugeuse).

5) Transfert 3mL de la couche d'acétate éthylique dans un nouveau tube centrifuge et s'évaporer à sec par l'azote ou avion au ℃ 50.

6) Dissolvez les résidus secs en n-hexane 2mL, ajoutez 1mL de la solution redissolvante diluée, mélange correctement pendant 30 secondes, centrifugeuse à au-dessus de 4000r/min à la température ambiante (℃ 20-25) pour la minute 10 ; Enlevez la phase de n-hexane de -couche (s'il y a d'émulsification, après élimination de la phase de n-hexane de -couche, incube l'échantillon au bain d'eau 70℃ pour 10-20min, le centrifuge à plusieurs reprises).

7) Prenez à 50 le µL du inférieur pour l'analyse.

Pli de la dilution de l'échantillon : 1

6. Procédures d'ELISA

6,1 instructions

1) Apportez tous les réactifs et bandes micro-bien à la température ambiante (℃ 20-25) avant emploi ;

2) Renvoyez tous les réactifs au ℃ 2-8 juste après l'utilisation ;

3) La reproductibilité de l'analyse d'ELISA, dans une large mesure, dépend de la cohérence du lavage de plat. L'opération correcte du lavage de plat est le point clé dans ELISA les procédures ;

4) Pour l'incubation aux températures constantes, tous les échantillons et réactifs doivent éviter l'exposition à la lumière, et chaque microplate devrait être scellé par la membrane de couverture.

6,2 procédures d'opération

1) Mettez le kit à la température ambiante (20-25°C) pendant au moins 30 minutes, notez que chaque réactif doit être secoué et mélangé bien avant l'utilisation, et mettez les bandes requises de microwell dans le cadre de plat. Des microplates inutilisés devraient être rescellés et stockés à 2-8°C, non congelé.

2) Préparation de solution : La prise 40 ml de 20× a concentré le tampon de lavage et le diluer avec de l'eau désionisé à 1h19 1 (1 part de 20× a concentré le tampon de lavage + 19 parts de l'eau désionisée). Ou préparez comme nécessaire.

3) Numérotation : Numérotez les microwells selon les échantillons et les solutions étalons ; chaque échantillon et solution étalon devraient être faits en double, et leurs positions devraient être enregistrées.

4) Ajoutez 50µL d'échantillon ou de solution étalon pour reproduire des puits ; ajoutez 50ul de conjugué d'enzymes à chaque puits, puis ajoutez 50µL de solution de travail d'anticorps, et secouez le plat pour se mélanger doucement. Scellez le microplate avec un film de couverture et incubez à 25°C pour 30min.

5) Versez le liquide dans les microwells, tapotement sec sur le papier absorbant, ajoutez 250 μL/well de tampon de lavage pour laver le plat de microwell pendant des 15-30s, puis sortez et tapotez sec avec le papier absorbant, répétez 4-5 fois. (S'il y a des bulles d'air après le tapement, les a coupées avec une astuce propre).

6) Développement de couleur : Ajoutez le µL 50 le µL du substrat A et 50 du substrat B à chaque puits. Secouez le plat à la main pour se mélanger doucement et incuber à 25°C pour la minute 15 dans l'obscurité pour le développement de couleur.

7) Analyse : Ajoutez le μL 50 de la solution d'arrêt à chaque puits. Mélangez doucement en secouant le plat à la main. Placez la longueur d'onde du lecteur de microplate à 450 nanomètre pour déterminer la valeur d'OD de chaque puits. (On lui recommande de lire la valeur d'OD à 450/630nm à double longueur d'onde d'ici 5 minutes).

7. Jugement de résultat

Il y a deux méthodes pour juger les résultats : le premier est le jugement approximatif, alors que le deuxième est la détermination quantitative. Note que la valeur d'OD de l'échantillon a une corrélation négative avec le contenu de SEM.

7,1 détermination qualitative

La gamme de concentration (ng/mL) peut être obtenue à partir de comparer la valeur moyenne d'OD de l'échantillon à celle de la solution étalon. Supposer que la valeur d'OD de l'échantillonⅠ est 0,3, et ce du Ⅱ témoin est 1.0ppb, la valeur d'OD des solutions étalons est : 2,243 pour 0ppb, 1,816 pour 0.02ppb, 1,415 pour 0.06ppb, 0,74 pour 0.18ppb, 0,313 pour 0.54ppb, 0,155 pour 1.62ppb, en conséquence la gamme de concentration du Ⅰ témoin est 0,54 à 1.62ppb, et ce du Ⅱ témoin est 0,06 à 0.18ppb.

7,2 détermination quantitative

Les valeurs moyennes des valeurs d'absorbance est obtenues pour la valeur moyenne d'OD (b) de l'échantillon et de la solution étalon divisés par la valeur d'OD (B0) de la première solution étalon (0 normes) et plus tard multipliés d'ici 100%, c.-à-d.,

Valeur de moyenne de B-the (doubles puits) OD de l'échantillon ou de la solution étalon

Valeur de la moyenne OD de B0-the de la solution étalon 0ng/mL

Dessinez la courbe standard avec les pourcentages d'absorption de la solution étalon et les valeurs de semilogarithm de la solution étalon de SEM (ng/mL) comme y et axe des abscisses, respectivement. Lisez la concentration correspondante de l'échantillon provenant de la courbe standard en incorporant son pourcentage d'absorption dans la courbe standard. La valeur en résultant est plus tard multipliée par le pli correspondant de dilution, obtenant finalement la concentration de SEM dans l'échantillon.

8. Précautions

1) Si la température ambiante est inférieure que 25℃ ou la température de réactif et l'échantillon ne reviennent pas à la température ambiante (20-25℃), la valeur standard d'OD chutera.

2) Pendant le procédé de lavage, le séchage du microplate sera accompagné de la non-linéarité de la courbe standard, et la reproductibilité n'est pas idéale ; , procédez donc à la prochaine étape juste après le lavage.

3) Mélangez bien, autrement la reproductibilité sera pauvre.

4) Arrêtez la solution est solution acide sulfurique de 2 M, évitent le contact cutané.

5) N'employez pas le kit au delà de la durée de conservation. L'utilisation des réactifs dilués ou frelatés du kit peut avoir comme conséquence les variations des valeurs de sensibilité et de détection OD. Ne remplacez pas les réactifs dans différentes séries de kits.

6) Rescellez les microplates inutilisés dans les sacs zip-lock. Les solutions étalons et les coupleurs sans couleur sont sensibles à la lumière et ne peuvent pas être directement exposés pour s'allumer.

7) Jetez n'importe quelle solution de coloration dont la couleur indique que la solution a dégradé. Une valeur de détection de moins de 0,5 pour la solution étalon 1 (0 ppb) indique la dégradation.

8) La température optimale de réaction est 25℃, et la sensibilité de détection et la valeur d'OD changeront si la température est trop haute ou si basse.

9. Date de stockage et d'échéance

Stockage : Le magasin à 2-8°C, ne gèlent pas.
Date d'échéance : 12 mois ; la date de production est sur la boîte.
Note : Si les fuites de emballage sous vide de microplate, il peuvent encore être employées sans affecter les résultats d'essai, ainsi vous peut l'employer avec confiance.

Q1 : Quand sera-t-il embarqué ?
A1 : Nous embarquerons les marchandises pour vous dès que possible dans un délai de 7 jours ouvrables après réception du paiement. (En cas de facteurs externes tels que l'épidémie, la livraison peut être retardée)

Q2 : Soutient-il OEM/ODM ?
A2 : Il peut être soutenu, mais la quantité spécifique doit être plus de 100 000 morceaux, qui est commode pour les produits adaptés aux besoins du client.

Q3 : Comment votre usine va-t-elle en termes de contrôle de qualité ?
A3 : Nous avons nationalement certifié ISO9001 et ISO13485. Notre processus de fabrication se conforme aux procédures standard pour assurer la qualité du produit optima.

Q4 : Comment fournir le service après-vente ?
A4 : Nous fournissons le service après-vente technique en ligne professionnel. Nous pouvons te fournir des conseils faces à face par l'intermédiaire de la vidéo, du téléphone, etc.

Q5 : Quelle est la méthode de paiement ?
A5 : Nous recevons le paiement par T/T.

Q6 : Comment se transporter ?
A6 : Choisissez la meilleure méthode de expédition pour vous en obtenant des citations de nos beaucoup de transporteurs coopératifs, et également de bateau selon vos conditions.