Ce kit est utilisé pour détecter les anticorps de la pullorose (PD) et de la typhoïde aviaire (FT) dans le sérum de poulet, afin d'aider au diagnostic sérologique des poulets infectés.

2. Principe

Le kit ELISA d'anticorps contre la maladie pullorale (PD) et la typhoïde aviaire (FT) est basé sur un dosage immunoenzymatique indirect (ELISA indirect). L'antigène est déposé sur des plaques.Lorsqu'un échantillon de sérum contient des anticorps spécifiques contre le virus, ils se lient à l'antigène sur les plaques.Laver les anticorps non liés et les autres composants.Ajouter ensuite un conjugué enzymatique spécifique.Après incubation et lavage, ajouter le substrat TMB.Une réaction colorimétrique apparaîtra, mesurée par un spectrophotomètre (450 nm).

3. Réactifs

Bandelettes de microtitrage revêtues d'antigène PD&FT	1 pièce (96 puits)
Conjugué enzymatique	1 bouteille (11 ml/bouteille)
10× solution de lavage	1 bouteille (50 ml/bouteille)
Substrat A/B solution	1 tube chacun (6 mL/tube)
Dilution de l'échantillon	1 bouteille (50 ml/bouteille)
Solution d'arrêt	1 tube (6 ml/tube)
Contrôle négatif	1 tube (800μL/tube)
Contrôle positif	1 tube (800μL/tube)
Plaque de dilution de sérum	1 pièce
Film adhésif	2 pièces
Instruction	1 pièce

4. Matériel nécessaire mais non fourni

1) Micropipettes et embouts jetables : 0,5 μL ~ 10 μL, 10 μL ~ 100 μL, 100 μL ~ 1 000 μL
2) Incubateur 37 ℃
3) Eprouvette graduée : 500 ml
4) Lecteur de microplaques 96 puits
5) Eau distillée ou eau déminéralisée
6) Machine à laver les biberons ou les microplaques

5. Préparation des échantillons

Prenez du sang total animal, faites du sérum selon les méthodes habituelles, le sérum doit être clair, sans hémolyse.

6. Préparation du tampon de lavage

Remettre la solution de lavage à température ambiante avant utilisation, s'il y a des cristaux salés, agiter pour faire dissoudre les cristaux, puis utiliser de l'eau distillée ou de l'eau déminéralisée pour la diluer 10 fois.La solution de lavage diluée peut être conservée 1 semaine à 4 ℃.

7. Dilution de l'échantillon

Sur la plaque de dilution du sérum, diluer le sérum à 1:99 avec la dilution de l'échantillon (par exemple : 495 μL de diluant d'échantillon + 5 μL de sérum)
Avis : Le contrôle négatif et le contrôle positif n'ont pas besoin d'être dilués.Échangez la pointe après avoir prélevé l'échantillon à chaque fois, enregistrez la situation de l'échantillon sur la plaque avec précision.Agiter l'échantillon uniformément avant de l'ajouter.

8. Remarques

1) Tous les réactifs doivent être ajustés à la température ambiante et secouer uniformément avant utilisation, stocker à 2-8 ℃ après utilisation
2) Ne pas échanger les réactifs des kits de différents numéros de lot à utiliser.Éviter la pollution des réactifs lors de l'utilisation.
3) La solution de substrat et d'arrêt peut avoir un excitant pour la peau et les yeux, faites attention lors de l'utilisation.
4) Ne pas exposer le TMB (Substrat B) à la lumière et éviter tout contact avec des antioxydants.
5) Les puits doivent éviter l'humidité ou le contact avec l'eau après le descellement (remettez la microplaque non utilisée dans le sac avec le déshydrateur dans 2 à 8 ℃ bientôt)
6) Traiter raisonnablement tous les déchets avant de les jeter pour éviter la pollution.
7) Respectez strictement les instructions pour obtenir le meilleur résultat.Toutes les procédures, y compris le pipetage, le minutage et le lavage, etc. doivent être précises.
8) La plaque de dilution du sérum est jetable, ne l'utilisez pas pour la deuxième fois ;le volume MAX de celui-ci est de 300μL/puits.

9. Procédure ELISA

1) Prenez une microplaque pré-enduite (peut se desceller pour plusieurs utilisations selon la quantité d'échantillon), ajoutez 100 μl de sérum dilué dans un puits, pendant ce temps, définissez 1 puits pour le contrôle négatif, le contrôle positif et les puits de contrôle vierges séparément.Ajoutez 100 μl de contrôle négatif/positif dans ses puits, ajoutez seulement 100 μl de dilution d'échantillon dans les puits de contrôle à blanc.Agiter doucement (ne pas renverser), incuber à 37℃ pendant 30 min.
2) Verser le liquide hors des puits, ajouter 250 μL de solution de lavage diluée dans chaque puits, statique pendant 1 min, verser.Répéter 3 fois, puis tapoter pour sécher sur du papier absorbant.
3) Ajouter 100 μL de conjugué enzymatique (à l'exception des puits vides) à chaque puits et incuber à 37 ℃ pendant 30 min.
4) Répétez l'étape 2 (lavage).N'oubliez pas de tapoter pour sécher sur du papier absorbant en dernier lieu.
5) Ajoutez 50 μL de substrat A, puis de substrat B (50 μL) à chaque puits, mélangez correctement, réagissez pendant 10 min à 37 ℃ dans l'obscurité.
6) Ajouter 50 μL de solution d'arrêt dans chaque puits et mesurer le résultat dans les 10 min.

10. Résultats

Réglez zéro pour le puits vierge et testez la valeur A450nm (630 nm comme référence) sur le lecteur de microplaques.Les conditions pour que le test soit tenable sont que la valeur A450nm des puits de contrôle positif soit supérieure ou égale à 0,5 et que la valeur A450nm des puits de contrôle négatif soit inférieure à 0,15.Si le test est invalide, l'opération est douteuse, retestez et observez attentivement tous les réactifs.
Si la valeur A450 de l'échantillon est supérieure à 0,2+ absorbance de la moyenne du contrôle négatif, elle est jugée positive ;et si moins de 0,2+ absorbance de la moyenne du témoin négatif, négatif.Si l'absorbance de la moyenne du contrôle négatif est inférieure à 0,05, calculer comme 0,05

Spécifications : 96 puits/kit.
Date de péremption : 12 mois.
Stockage : Stockage à 2-8℃, dans l'obscurité.

Q1 : Combien de temps vous faudra-t-il pour expédier ?
A1 : généralement expédié sous 7 jours ouvrables.

Q2 : prenez-vous en charge OEM/ODM ?
A2 : peut être pris en charge.Nous pouvons personnaliser en fonction de vos besoins spécifiques et de quantités spécifiques.

Q3 : Comment se porte votre usine en termes de contrôle qualité ?
A3: Nous avons la certification ISO9001 et la certification ISO13485, jusqu'à présent tout le processus de production, nous avons des règles standard, nous nous conformons au comportement et aux lois pertinentes du gouvernement.

Q4 : Le service après-vente est-il garanti ?
A4: Nous fournissons un service après-vente technique en ligne professionnel.Si le produit échoue pendant l'expérience, nous pouvons fournir
conseils personnalisés par téléphone, vidéo et autres formulaires.

Q5 : Quelle est votre quantité minimum de commande ?
A5 : 1Kit.

Q6 : Quelle est la méthode d'expédition ?
A6: Il peut être expédié par exprès (FEDEX, UPS, DHL, EMS, etc.) ou par voie aérienne et terrestre. Veuillez confirmer avec nous avant de passer une commande.

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