Kit acide nucléique de détection d'ACP de kit de vibrio parahaemolyticus
(Méthode ACP-fluorescente de sonde)
Utilisation prévue :
Ce kit convient à la détection spécifique de vibrio parahaemolyticus pathogène (Vpa) dans l'amorce, les échantillons d'eau, les jeunes plantes de crevette, les tissus de crevette et les produits traités.
Principe :
Ce kit emploie un fragment spécifique de vibrio parahaemolyticus (Vpa) pour concevoir une sonde de sonde d'amorce, qui peut spécifiquement lier à une SECTION de calibre d'ADN au milieu de la région d'amplification d'amorce. Pendant le processus d'extension d'ACP, l'activité d'exonuclide de l'enzyme de Taq coupe le 5" - terminal fluorophore de la sonde et le rend libre dans le système de réaction. Ainsi, le 3" - le groupe éteint par extrémité a été séparé, et la fluorescence a été émise, qui a été détectée par l'instrument d'ACP de fluorescence pour réaliser la détection de l'acide nucléique de vibrio parahaemolyticus (Vpa) dans le système de réaction complètement fermé.
Composantes principales :
| Composant |
Spécifications |
| Liquide de réaction d'ACP |
24 tubes |
| Contrôle positif |
1 tube |
| Contrôle négatif |
1 tube |
Note : les composants dans différentes séries de kits ne devraient pas être interchangeables.
Conditions d'échantillon :
1. Type témoin
Jeune plante de crevette, tissu de crevette, corps de l'eau, amorce, produits traités, etc.
2. Prélevez la collection et le transport
Prélevez la collection et le transport sera effectué selon NY/T 541. Des échantillons seront transportés dès que possible au laboratoire dans des conditions réfrigérées pour éviter gel-dégel répété.
3. Conservation d'échantillon
Il peut être stocké pendant 24 heures à 2℃~8℃, et peut être stocké pendant longtemps à -20℃.
Utilisant Micgene 242/244/244IVD et ABI QuantStudio 5 :
des procédures sont placées en tant que ci-dessous :
| Étapes |
Nombre de cycle
|
La température |
Temps |
| 1 |
1 |
95℃ |
3min |
| 2 |
45 |
95℃ |
10s |
| 60℃ |
30sCollect le fluorescent
|
FAM a été choisi pour le canal de détection.
Les résultats de l'interprétation
| Résultats |
Valeur de Ct |
| Positif |
Ct≤40 |
| Négatif |
Aucune valeur ou Ct value≥45 de Ct |
| Région de gris |
40<Ct<45>
|
Note : Le résultat est jugé pour être une zone grise, qui doit être revérifiée. Si revérifiez le résultat est valeur de Ct < 45="" is="" considered="" as="" positive="">
Analyse de résultat :
Analyse automatique utilisant l'instrumentation
Contrôle de qualité :
Contrôle négatif : Aucune courbe évidente d'amplification de canal de détection de FAM ;
Contrôle positif : Le canal de FAM a montré la courbe évidente d'amplification, la valeur ≤30 de Ct ;
Les conditions ci-dessus sont remplies simultanément dans la même expérience ; autrement, l'expérience est invalide et retester est exigé.
