Kit acide nucléique principal jaune de détection du virus (YHV) (méthode Droite-ACP-fluorescente de sonde)
Utilisation prévue :
Ce kit convient à la détection spécifique du virus principal jaune pathogène (YHV) dans les prélèvements de tissu tels que des ouïes, des glandes d'antennes, des tissus hématopoïétiques et des organes lymphatiques de crevette rose de Penaeus.
Principe :
Ce kit utilise l'ARN comme calibre et les amorces comme point de départ pour synthétiser des brins de cDNA complémentaires au calibre d'ARN sous l'action du transcriptase inverse à haute efficacité. Choisissez la sonde spécifique de conception conservatrice de gène de virus de gobelet de chat, la sonde peut avec le secteur d'amplification d'amorce au milieu d'un calibre obligatoire spécifique d'ADN, en cours d'extension d'ACP, les enzymes entourées de polymérase de Taq du 5" extrémité des groupes fluorescents sur la sonde sera réduit, le rend libre dans le système de réaction, éteignant de ce fait des groupes hors du 3" extrémité, la lueur, l'acide nucléique de la tête jaune de crevette rose que le virus (YHV) a été détecté par ACP de fluorescence dans un système de réaction complètement fermé.
Composantes principales :
| Composant |
Spécifications |
| Liquide de réaction d'ACP |
24 tubes |
| Contrôle positif |
1 tube |
| Contrôle négatif |
1 tube |
Note : les composants dans différentes séries de kits ne devraient pas être interchangeables.
Conditions d'échantillon :
1. Type témoin
Prélèvements de tissu de crevette rose
2. Collection témoin
Des échantillons ont été rassemblés selon SNT 1151.4-2003.
Prenez le tissu frais de crevette rose comme échantillon.
2,1 pour les larves ou la jeune crevette, la crevette ou les têtes entière de crevette sont prises comme échantillons. Pour enlever la tête, utiliser des ciseaux et des brucelles de stérilisation pour enlever les yeux, le plastron, toutes les annexes thoraciques, et l'abdomen derrière la tête.
2,2 pour la crevette adulte, des filaments d'ouïe, les organes lymphatiques ou la hémolymphe ont été pris comme échantillons.
3. Conservation d'échantillon
Il peut être stocké pendant 24 heures à 2℃~8℃, et peut être stocké pendant longtemps à -20℃.
Amplification d'ACP et détection de fluorescence (secteur de détection d'ACP) :
Mettez chaque tube de réaction dans l'instrument d'ACP et exécutez l'amplification d'ACP selon les procédures suivantes :
| Étape |
Nombre de cycle |
La température |
Temps |
| 1 |
1 |
50℃ |
20min |
| 2 |
1 |
95℃ |
2min30s |
| 3 |
45 |
95℃ |
10s |
| 60℃ |
30s rassemblent le fluorescent |
FAM est choisi pour des canaux de détection.
Contrôle de qualité :
- Contrôle négatif : Aucune courbe évidente d'amplification de canal de détection de FAM ;
- Contrôle positif : Le canal de FAM a montré la courbe évidente d'amplification, la valeur ≤30 de Ct ;
- Les conditions ci-dessus sont remplies simultanément dans la même expérience ; autrement, l'expérience est invalide et retester est exigé.
Les résultats de l'interprétation
| Résultats |
Valeur de Ct |
| Positif |
Ct≤38 |
| Négatif |
Aucune valeur ou Ct value≥45 de Ct |
| Région de gris |
38<Ct<45> |
Note : Le résultat est jugé pour être une zone grise, qui doit être revérifiée. Si revérifiez le résultat est valeur de Ct < 45="" is="" considered="" as="" positive="">
Index de performance des produits :
1. Exactitude
Les documentations de référence positives des entreprises de essai étaient tout positives.
2. Limite de détection minimum : la limite de détection de ce kit est 10copies/μL.
3. Précision : Le coefficient de variation (cv, %) de valeur de Ct de précision d'intra-groupe est ≤5%.
4. Coefficient de corrélation linéaire et linéaire | r | > 0,980.
Les détails d'opération satisfont vérifient d'IFU !
