Kit de Diagnositc pour l'anticorps d'IgM au virus de l'hépatite E (ELISA)
Catalogue non : BE402A
1. PRINCIPE
Ce kit utilise la phase solide, la technique ELISA de capture pour la détection des anticorps d'IgM à HEV (anti-HEV) en sérum ou le plasma avec la procédure en deux étapes d'incubation. Le microwell de polystyrène est enduit d'un préenduisage avec de l'anti anticorps monoclonal humain activé purifié d'IgM de souris (chaîne de μ). Le HRP a conjugué l'antigène de recombinaison de HEV sert de traceur. TMB est substrat pour HRP. La réaction enzymique au substrat TMB produit un changement de couleur, et l'intensité de l'absorbance à 450 nanomètre indique la présence ou l'absence d'anti-HEV anticorps IgM dans l'échantillon. L'essai est spécifique, sensible, reproductible et facile à utiliser. Il est pour le diagnostic de l'enquête tôt d'infection et d'épidémie.
2. MATÉRIAUX FOURNIS
1. Bloc bon micro enduit du plat 1 d'antigène (96wells)
2. diluants de spécimen 1 bouteille (12ml)
3. enzyme Conjugant (anti IgM humain - HRP) 1 bouteille (12ml)
4. fiole du contrôle 1 de négatif (1ml)
5. fiole du contrôle 1 de positif (1ml)
6,20 tampon de lavage de X (dilution avant l'utilisation) 1 bouteille (30ml)
7. bouteille du substrat A 1 (6ml)
8. bouteille du substrat B 1 (6ml)
9. arrêtez la solution (2M H2SO4) 1 bouteille (6ml)
10. sac du sachet en plastique 1
11. morceaux de papier de joint 3
12. Manuel 1 pièce
PROCÉDURE 3TEST
1. Amenez ELISA Kit pour l'anticorps IgG au virus de l'hépatite E (tous les réactifs), et les spécimens à la température ambiante avant emploi (approximativement 30 minutes).
2. 1h19 de tampon de lavage concentré Dilute avec ddH2O.
3. Pour chaque essai, en blanc de l'ensemble un, deux contrôles positifs et trois négatifs. Ajoutez le sérum positif et négatif de 100μl de contrôle dans les puits positifs et négatifs de contrôle respectivement.
4. Ajoutez les diluants témoin 100μl dans l'un l'autre essai bien, puis au spécimen d'essai de 10 μl dans les puits d'essai. Introduisez à la pipette en haut et en bas pour mélanger les échantillons bien.
5. Les puits de couverture avec le papier de joint, et incubent alors 30 minutes à 37°C.
6. Jetez le liquide dans tous les puits et remplissez puits de solution de lavage. La configuration de côté pendant 15 secondes, jettent le liquide dans tous les puits et remplissent puits de solution de lavage. Répétez 5 fois et puits secs après dernier Washington.
7. Ajoutez l'enzyme Conjugant de 100 μl dans chaque puits excepté le blanc.
8. Les puits de couverture avec le papier de joint, et incubent alors 30 minutes à 37°C.
9. Répétez l'étape 6.
10. Ajoutez 50μl le substrat A et B respectivement à chaque puits comprenant le blanc bien. Mélangez doucement, protégé contre la lumière et incubez 15 minutes à 37°C.
11. Ajoutez 50μl de solution d'arrêt dans chaque puits pour arrêter la réaction, y compris le puits vide.
12. Mesurez l'absorbance à 450 nanomètre par rapport au blanc, ou mesurez l'absorbance à 450 nm/630-690 nanomètre.
