Kit rapide léger d'essai/kits examen de diagnostic pour la détection d'acide nucléique

[Nom de produit] kit de détection d'acide nucléique du virus COVID-2019 (double-RTPCR) [article NON] A001

[Types de produit] 50 essais/kit

[Utilisation prévue]

Ce kit est employé pour la détection d'acide nucléique du syndrôme respiratoire aigu grave nouveau (2019-ncov) dans toutes sortes d'échantillons de voies respiratoires, tels que l'écouvillon pharyngeal, le crachat, le fluide de lavage alvéolaire, etc. On peut être employé pour le diagnostic auxiliaire des patients présentant l'infection nouvelle de syndrôme respiratoire aigu grave ou suspecter les résultats de l'infection nouvelle de syndrôme respiratoire aigu grave, fournissant à la base diagnostique moléculaire pour des patients l'infection.

[Principe d'essai]

L'ensemble deux d'amorces d'ACP et les sondes ont été conçus ont basé sur l'ordre conservateur du gène de vue de codage de lecture Open (ORF1ab) et du gène de protéine de noyau (gène de N) du syndrôme respiratoire aigu grave nouveau (2019-nCoV), et le kit de détection a réalisé simultanément la détection des cibles mentionnées ci-dessus avec la spécificité élevée. Avec la réaction d'ACP allant, le signal de fluorescence produit par la sonde a pu être détecté par le détecteur automatique d'ACP de fluorescence et le suivi en temps réel réalisé de RT-PCR. [Composition]

Note : Le contrôle de qualité positif et le contrôle de qualité négatif seront placés pour que chaque essai surveille l'environnement de corps et d'opération d'essai ; les produits négatifs et positifs de contrôle de qualité ont été emballés dans le kitand peuvent être employés directement sans extraction.

[Conditions de stockage et date d'échéance]

1. Maintenez à partir de la lumière et de l'at-20±5℃.Transport scellé au ℃ 2~8 ou dans le type environnements de glace carbonique pendant 7 jours tout au plus. Il a une durée de conservation de 6 mois.

2. Avoid a répété les cycles gel-dégel. Cinq cycles gel-dégel n'affecteront pas les résultats de détection.

[Instruments applicables]

Elle peut être adaptée à l'instrument quantitatif fluorescent en temps réel d'ACP avec FAM et aux canaux de sortilège (VIC/Joe) de divers fabricants.

[Condition d'échantillon]

1. Type applicable témoin : fluide de lavage alvéolaire, écouvillon de gorge, crachat.

2. Collection témoin : rassemblez les échantillons dans des conteneurs stériles avec un volume témoin sans moins que 1ml.

• Prélevez le stockage et le transport : les échantillons à examiner peuvent être placés au ℃ 2 | le ℃ 8 pendant 72 heures, et à l'entreposage à long terme sera placé au ≤ - le ℃ 20 pour éviter la congélation répétée et le dégel. Les spécimens ont été transportés dans des bouteilles de bordage scellées avec de la glace ou dans des boîtes de mousse scellées avec de la glace.

[Étapes]

1. traitement d'échantillon (salle de traitement d'échantillon)

Type de spécimen : spécimen supérieur de voies respiratoires (URT) : y compris l'écouvillon pharyngeal, l'écouvillon nasal, l'extrait de nasopharynx et le rinçage pharyngeal.

2 S-A001A1

Abaissez le spécimen de voies respiratoires (LRT) : y compris l'extrait de voies respiratoires, fluide de broncholavage, spécimen de biopsie de tissu de poumon.

Des méthodes de transformation d'échantillon sont montrées dans la table suivante :

2. extraction de l'ARN viral

L'individu a préparé le réactif d'extraction, ou selon les instructions du kit viral d'extraction d'acide nucléique d'ARN (méthode de centrifugation) de Guangzhou DEAOU Biotechnology Co., Ltd

3. préparation de réactif (pièce de préparation de réactif)

3.1. Sortez les composants dans la caisse d'emballage et placez-les à la température ambiante. Après que la température soit équilibrée à la température ambiante, mélangez eux également et le centrifugat ils pour une utilisation ultérieure.

3.2. Préparez la solution de réaction selon le nombre requis de tubes de réaction. Placez le nombre requis de tubes de réaction comme n (n = nombre d'échantillons + 1 contrôle positif de tube + 1 contrôle négatif de tube). La méthode de préparation est comme suit :

Après mélange du système de réaction préparé, chaque tube de réaction obtient à 20 le μ L solution de réaction et 20 le μ l liquide d'isolement est ajouté à chaque tube. Transfert au secteur de traitement d'échantillon.

4. s'ajouter d'échantillon (salle de traitement d'échantillon)

Prenez 5μL des échantillons ci-dessus traités, du contrôle positif et du contrôle négatif respectivement et ajoutez-les dans le tube correspondant de réaction de l'ACP 0.2ml, fermez le tube et transférez-les au secteur de détection.

Note : en cours d'échantillon ajoutant, il est nécessaire d'éviter d'utiliser la pipette pour souffler à plusieurs reprises, pour pour ne pas causer un grand nombre de bulles qui affecteront les résultats expérimentaux. En outre, il est nécessaire de centrifuger pendant une courte période avant d'utiliser la machine pour l'amplification, afin d'enlever les bulles autant que possible. amplification 5.PCR (pièce d'amplification d'ACP)

5,1 arrangement d'instrument (prenez l'instrument ABI7500 comme exemple)

Mettez le tube de réaction d'ACP dans l'instrument d'ACP, et placez les échantillons négatifs, positifs et inconnus selon l'ordre correspondant des échantillons. Puisque ce kit a besoin de double détection, il contient deux sondes avec différents labels fluorescents. FAM et canaux de Vic devraient être choisis simultanément pour rapporter les groupes fluorescents.

5.2. Procédure d'amplification

La collection de signal de fluorescence est placée au ℃ 60, et le système de réaction est placé 25 au μ L.

[Norme de contrôle de qualité]

6. analyse de résultat

La ligne de base est placée avec 3-10 ou 6-15 cycles de signaux de fluorescence. Le principe d'arrangement de seuil est que la ligne de seuil dépasse juste le point le plus élevé de la courbe négative d'amplification de contrôle, et elle peut également être ajustée selon l'état de bruit.

Jugement de résultat

[index de performance des produits]

1. Spécificité

La sonde d'amorce utilisée dans ce kit est conçue selon l'ordre conservé du syndrôme respiratoire aigu grave nouveau (2019-ncov), qui a un taux élevé de détection pour le fragment de gène de cible. Ce kit n'a aucune réaction croisée aux échantillons du syndrôme respiratoire aigu grave (NL63, HKU1, 229 e229e OC43, SRAS de SRAS), grippe un virus,

virus de l'hépatite b, virus syncytial respiratoire, adénovirus, virus de la grippe, bacille de klebsiella de pneumonie, streptocoque pneumoniae, Hemophilus influenzae, Pseudomonas aeruginosa, legionella éosinophile de poumon, bacili de coqueluche, mycoplasma de Staphylococcus aureus et de pneumonie et chlamydia de pneumonie. Le taux de coïncidence de documentations de référence positives et négatives aux entreprises d'essai is100%.

2. précision

Le coefficient de variation (CV%) de valeur de CT dans les résultats d'essai est inférieur ou égal à 5%.

3. Limite de détection minimum

La limite de détection minimum de ce kit est 1000 copies/ml.

4. Gamme linéaire

2×10 ~2×10 copies/mL

[Notes]

1. Ce produit est seulement employé pour le diagnostic externe.

2. La détection de l'acide nucléique viral dépend du traitement correct de l'échantillon, du transport, de la préparation, de la collection déraisonnable témoin etc., traitant, transport et la basse concentration d'échantillon peut mener aux résultats de faux négatif.

3. L'essai d'ACP ou l'essai connexe sera actionné par la personne qualifiée ou familière.

4. Le négatif et la substance positive de contrôle seront placés pour chaque essai.

5. Veuillez actionner l'expérience strictement dans différents secteurs. Les articles dans chaque secteur sont pour le but spécial. Ne croisez pas les emploient pour éviter la pollution. Nettoyez l'établi juste après l'expérience.

6. Tous les échantillons d'essai seront considérés comme les substances infectieuses. Pendant l'expérience, des gants jetables de clothesand de travail seront portés et des gants seront remplacés fréquemment pour éviter la contamination croisée entre les échantillons. L'opération et l'élimination des déchets d'échantillon répondront aux exigences des lois appropriées et des règlements : « Les orientations pour la sécurité biologique des laboratoires microbiologiques et biomédicaux « et des « règlements sur la gestion des déchets clinique » ont publié par le ministère de la Santé.

7. l'hypochlorite de 10% ou l'alcool de 75%, l'émetteur à rayonnement ultraviolet ou l'ozone seront employés instrument pour désinfecter la plate-forme d'opération, la pipette, la centrifugeuse, d'ACP amplification et d'autres équipements.