T4 ligase de l'ADN, LC
Catégorie N°/spécification: E1014-E/1000 Weiss U
Concentration: 1 unité de Weiss/μl
Description du produit
La ligase T4 catalyse la formation de liaisons phosphodiester entre les terminaisons 5'-phosphate et 3'-hydroxyle juxtaposées dans l' ADN ou l' ARN à double chaîne.Cette enzyme est capable de réparer les coupures d'un seul brin dans l'ADN à double brin, ARN, ou hybrides ADN/ARN, et peut rejoindre des fragments d'ADN avec des extrémités collantes ou contondantes, mais il est inactif sur les acides nucléiques à un seul brin.
La ligase ADN T4 nécessite l'ATP comme cofacteur.
Condition de stockage et durée de conservation
Conserver à -20°C. Le produit est valable 2 ans.
Quelle source
Souche recombinante d'E. coli contenant le gène 30 clonée à partir d'un bactériophage T4.
Définition de l'unité
À 37 °C, 1 unité d'enzyme de Weiss catalyse la conversion de 1 nmol de [32PPi] en un état d'adsorption du charbon actif en 20 minutes.
L'activité enzymatique est déterminée dans le mélange suivant: 66 mM Tris-HCl (pH 7,6), 6,6 mM MgCl2, 0,066 mM ATP, 10 mM DTT, 3,3 μM [32P] orthophosphate (PPi).
Une unité de Weiss équivaut à environ 200 unités de ligation de bout cohérent (UCE), ce qui équivaut au nombre de fragments d'ADN digérés par HindIII qui peuvent être liés en 30 minutes à 16 °C.λ fragments d'ADN.
Le champ d'application
- Fragments d'ADN générés par des enzymes de restriction du clonage
- Produits PCR clonés
- Ligation d'oligonucléotides à double chaîne ou d'adaptateurs à l'ADN
- Mutagénèse localisée
- Polymorphisme de longueur de fragment amplifié (AFLP)
- Détection de l'ARN par ligase
- réparation de nick dans l'ADN à double chaîne, l'ARN ou les hybrides ADN/ARN
- Autocirculation de l' ADN linéaire
