Analyseur de toxines des moisissures ST-2000A teneur en aflatoxine B1 Plage de longueur d'onde 400-900 nm Répétabilité ≤ 0,3%

ST-2000A Essai de mycotoxine

L'analyseur de mycotoxine ST-2000A est un instrument d'analyse nécessaire pour l'analyse des aflatoxines et de l'immunosorbent lié aux enzymes.à savoir l'analyse immunosorbente liée aux enzymes (ELISA), est composé de cet instrument et du kit B1,qui peut être utilisé pour déterminer la teneur en aflatoxine B1 et autres mycotoxines dans des échantillons de manière limitée et quantitative (s'il est équipé d'autres kits)Il est largement utilisé pour détecter l'aflatoxine B1 et d'autres mycotoxines dans les aliments, les aliments pour animaux, les huiles, les produits laitiers, les médicaments, les boissons, le vin et autres produits.

Caractéristiques de performance:

1Opération d'affichage: écran LCD couleur, tableau de distribution vidéo, affichage de l'ensemble des informations du tableau, fonctionnement de l'écran tactile

2Fonction de plaque vibrante: vitesse de plaque vibrante de niveau 3, temps réglable de 0 à 255 secondes

3Station de travail: logiciel professionnel de marqueur d'enzymes, qui peut stocker 500 groupes de programmes, 100000 résultats d'échantillons et fournir des modes de calcul riches tels que l'absorbance, l'équation linéaire,équation logarithmique, équation quadratique, équation cubique, absorbance pourcentage-concentration équation logarithmique, fonction spline, taux d'inhibition, etc.

Paramètres techniques:

Source lumineuse: lampe halogène importée DC12V 22W

Plage de longueur d'onde: 400 à 900 nm

Filtre: 405, 450, 492, 630nm en standard, autres longueurs d'onde en option

Plage de lecture: 0 à 4 000 Abs

Résolution: 0,001Abs

Erreur d'indication: ≤ ± 0,01Abs

Stabilité: ≤ ± 0,003Abs

Répétabilité: ≤ 0,3%

Taille: 400 mm * 260 mm * 200 mm

1 Principe et application

Ce kit utilise la méthode ELISA compétitive indirecte pour détecter l'aflatoxine B1 (AFB1) dans les céréales, les aliments pour animaux et autres échantillons.marqueur d'enzyme du raifort, anticorps, réactifs standard et autres réactifs correspondants.l'aflatoxine B1 dans l'échantillon et la plaque enzymatique sont pré-enduites de l'antigène conjugué pour concurrencer l'anticorps anti-aflatoxine B1Après l'ajout du marqueur enzymatique, utilisez le substrat TMB pour développer la couleur.La quantité résiduelle d'aflatoxine B1 dans l'échantillon peut être obtenue en comparant avec la courbe standard.

2 Indicateurs techniques

2.1 Sensibilité du kit: 0,03 ppm (ng/ml)

2.2 Mode de réaction: 25 °C, 30 min à 15 min

2.3 Limites inférieures de détection:

Céréales 0,15 ppm

Pour les aliments pour animaux à base de préparations alimentaires

Huile comestible de cacahuète 0,6 p.p.

Sauce de soja, blé et autres aliments pour animaux

Bière 0,3 ppb

Vin, sauce de soja, vinaigre 0,15 p.p.

2.4 Vitesse de réaction croisée:

Aflatoxine B1 100%

2.5 Taux de récupération des échantillons:

Céréales et aliments pour animaux à base de légumes 85% ± 15%

Noix de cacahuète 82 ± 15%

Huile comestible 85 ± 15%

Sauce de soja, blé et autres aliments pour animaux

Bière 84 ± 15%

Vin, sauce de soja, vinaigre... 87 ± 15%

3 Composition du kit

Plaque de marquage des enzymes 96 trous

Solution standard (couvercle noir): 1 ml chacun

0ppb,00,03 pppb,00,06 pppb,00,12 pppb,00,24 ppm,0.48 ppm

Solution standard élevée: 100 ppm 1 ml

Marqueur enzymatique (cap rouge) 5,5 ml

Solution d'action d'anticorps (bouchon bleu) 5,5 ml

Solution de substrat A (cap blanc) 6 ml

Substrate liquide B (couverture noire) 6 ml

Solution d'arrêt (capuchon jaune) 6 ml

20X solution de lavage concentrée (couvercle blanc)

Manuel d'utilisation 1 exemplaire

4 Équipement et réactifs requis

4.1 Appareil: testeur d'aflatoxine, imprimante, homogénéiseur, dispositif de séchage de l'azote, oscillateur, centrifugeuse, pipette graduée, balance (sensibilité 0,01 g)

4.2 Micropipette: à canal unique 20 μl à 200 μl, 100 μl à 1000 μl, à canal multiple 300 μl

4.3 Réactif: méthanol, n-hexane, trichlorométhan ou dichlorométhan

5 Pré-traitement de l'échantillon

5.1 Instructions avant le traitement des échantillons:

L'appareil expérimental doit être propre et utiliser une tête d'aspiration jetable afin d'éviter toute contamination et toute interférence avec les résultats de l'expérience.

5.2 Préparation de la solution:

Solution 1: extrait de l'échantillon

70% de méthanol, c'est-à-dire V méthanol: V eau désionisée=7:3.

5.3 Étapes de prétraitement des échantillons:

5.3.1 Méthode de transformation des céréales

1) Peser 2 g d'échantillon broyé dans un tube centrifugeur de 50 ml, ajouter 5 ml de solution d'extraction d'échantillon, secouer pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes au centre de séparation;

2) Prenez 0,5 ml de surnaturant, ajoutez 0,5 ml d'eau désionisée et mélangez bien;

3) Prenez 50 μl d'analyse.

Ratio de dilution de l'échantillon: 5 Limite de détection inférieure: 0,15 ppm

5.3.2 Méthodes de traitement pour les échantillons présentant une forte absorption de l'eau tels que les écailles de maïs et les sonneries de blé

1) Peser 2 g d'échantillon broyé dans un tube centrifugeur de 50 ml, ajouter 20 ml de solution d'extraction d'échantillon, agiter pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes au centre de séparation;

2) Prenez 0,5 ml de supernatant, ajoutez 0,5 ml d'eau désionisée, et mélangez bien; (Pour l'échantillon avec une teneur extrêmement élevée en toxines, il peut être dilué avec 35% de méthanol, puis testé.1 ml de solution mélangée dans 2) et 0.9 ml de méthanol à 35% à mélanger. Le rapport de dilution de l'échantillon final est de 200 et la limite de détection est de 6 ppm.)

3) Prenez 50 μl d'analyse.

Ratio de dilution de l'échantillon: 20 Limites inférieures de détection: 0,6 ppm

Remarque: la distribution de la toxine dans l'échantillon étant inégale, il est nécessaire de prélever des échantillons à partir de plusieurs points et de les mélanger complètement avant de prélever 2 g pour l'essai.

5.3.3 Méthode de transformation des aliments pour animaux pour animaux à préparation alimentaire

1) Peser 2 g d'échantillon écrasé dans un tube centrifugeur de 50 ml, ajouter 10 ml de solution d'extraction d'échantillon, agiter pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes au centre de séparation;

2) Prenez 0,5 ml de surnaturant, ajoutez 0,5 ml d'eau désionisée et mélangez bien;

3) Prenez 50 μl d'analyse.

Rapport de dilution de l'échantillon: 10 Plage de détection inférieure: 0,3 ppm

5.3.4 Méthodes de traitement des aliments pour animaux à base d'huile alimentaire, d'arachides et de matières grasses

1) Peser 2 g d'échantillon broyé dans un tube centrifugeur de 50 ml, ajouter 8 ml de n-hexane et 10 ml de solution d'extraction d'échantillon, secouer pendant 5 min, 4000 tr/min à température ambiante/10 min du centre de séparation;

2) Retirer le liquide supérieur, prendre 0,5 ml du liquide inférieur et ajouter 0,5 ml d'eau désionisée, bien mélanger, puis prendre 0,5 ml du liquide mélangé et ajouter 0,5 ml de 35% de méthanol, agiter pendant 30 secondes;

3) Prenez 50 μl d'analyse.

Ratio de dilution de l'échantillon: 20 Limites inférieures de détection: 0,6 ppm

5.3.5 Aliments ou condiments tels que sauces, blé, biscuits, pâtisseries et méthodes de transformation des aliments pour animaux telles que le concentré d'aliments pour animaux

1) Peser 2 g d'échantillon écrasé dans un tube centrifugeur de 50 ml, ajouter 10 ml de solution d'extraction d'échantillon, agiter pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes au centre de séparation;

2) Prenez 2 ml de surnaturant, ajoutez 4 ml de trichlorométhane (ou dichlorométhane), agitez pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes au centre de séparation;

3) Transférer le liquide supérieur dans un autre récipient, laisser le liquide inférieur en veille, ajouter 4 ml de chloroforme (ou de dichlorométhane) au liquide supérieur, agiter complètement et mélanger pendant 5 minutes,et la température ambiante est de 4000 tr/min/centre de séparation pendant 10 minutes;

4) Retirer le liquide supérieur, mélanger le liquide inférieur deux fois et mélanger complètement;

5) Prenez 2 ml du liquide inférieur combiné et soufflez-le à sec sous l'azote à 50-60 °C;

6) Ajouter 0,5 ml d'extrait d'échantillon pour dissoudre complètement la substance séchée, puis ajouter 0,5 ml d'eau désionisée pour le mélange;

7) Prenez 50 μl d'analyse.

Rapport de dilution de l'échantillon: 10 Plage de détection inférieure: 0,3 ppm

5.3.6 Mode de transformation de la bière

1) Remuer complètement la bière (enlever le CO2), prélever 2 ml d'échantillon de bière, ajouter 1 ml d'eau distillée, ajouter 7 ml de méthanol et agiter pendant 5 min;

2) Prendre 0,5 ml de solution d'échantillon mélangée et ajouter 0,5 ml d'eau désionisée pour bien mélanger;

3) Prenez 50 μl d'analyse.

Rapport de dilution de l'échantillon: 10 Plage de détection inférieure: 0,3 ppm

5.3.7 Méthode de traitement du vin, de la sauce de soja et du vinaigre

1) Prenez 2 ml d'échantillon, ajoutez 2 ml d'eau distillée, ajoutez 10 ml de trichlorométhane (ou dichlorométhane), agitez pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes au centre de séparation;

2) Prenez 1 ml du liquide inférieur et soufflez-le à sec sous 50 à 60 °C d'azote;

3) Ajouter 0,5 ml d'extrait d'échantillon pour dissoudre complètement la substance séchée, puis ajouter 0,5 ml d'eau désionisée et bien mélanger;

5) Prenez 50 μl d'analyse.

Ratio de dilution de l'échantillon: 5 Limite de détection inférieure: 0,15 ppm

6 étapes de l'ELISA

Retirer le réactif requis de l'environnement de stockage à froid à 4 °C et le placer à température ambiante pendant plus de 30 min.Il peut y avoir des cristaux qui doivent être restaurés à température ambiante pour se dissoudre complètement lorsque la solution de lavage est stockée au froid. Chaque réactif liquide doit être secoué avant utilisation. Retirez le nombre requis de plaques et de cadres microporous, mettez les plaques microporouses non utilisées dans des sacs autocollants et conservez-les à 2-8 °C.

Avant l'expérience, 20 × La solution de lavage concentrée est diluée 20 fois en solution de lavage de travail.

6.1 Numérotation: numérotation des puits correspondants de l'échantillon et de la norme en séquence, réalisation de deux trous parallèles pour chaque échantillon et chaque norme et enregistrement de la position du trou standard et du trou d'échantillonnage..

6.2 Réaction d'ajout d'échantillon: ajouter 50 μl/puits de norme ou d'échantillon dans leurs puits respectifs, puis ajouter 50 μl/puits de marqueur enzymatique, puis ajouter 50 μl/puits de solution de travail d'anticorps,sceller la plaque avec une membrane de plaque de couverture, secouer doucement pendant 5 secondes, mélanger et réagir à 25 °C pendant 30 minutes.

6.3 Lavage: retirer soigneusement la membrane de la plaque de couverture, sécher le liquide dans le trou, laver complètement le trou avec une solution de lavage de travail de 250 μl par trou pendant 5 fois, avec un intervalle de 30 secondes,et tapez-le à sec avec du papier absorbant (les bulles qui ne sont pas retirées après la tape peuvent être percées avec une tête de pistolet propre).

6.4 Développement de la couleur: ajouter 50 μl de solution de substrat A et 50 μl de solution de substrat B à chaque trou, secouer doucement pendant 5 secondes, bien mélanger et développer la couleur dans l'obscurité à 25 °C pendant 15 minutes.

6.5 Termination: ajouter 50 μl de solution de finition à chaque trou, secouer doucement et bien mélanger pour terminer la réaction.

6.6 Mesure de la valeur d'absorption: utiliser le testeur d'aflatoxine pour mesurer la valeur d'absorption de chaque trou à 450 nm (double longueur d'onde 450/630 nm est recommandée).La détermination doit être achevée dans les 10 minutes suivant la fin de la réaction.

6.7 Le testeur automatique d'aflatoxines ST-2000A complète automatiquement la détermination et produit automatiquement les résultats.