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L'essai de l'anticorps ELISA de HBeAb détectent l'anti-HBe anticorps, 96wells/kit, méthode de sandwich Elisa, pour la mesure quantitative
Nom de produit :
Kit d'essai de l'anticorps ELISA de HBeAb
Anti-HBe kit d'essai de l'anticorps ELISA
Utilisation prévue :
L'anti-HBeAg anticorps (HBeAb) l'EIE est un immunoessai qualitatif d'enzymes pour la détection de l'anticorps l'antigène d'e du virus de l'hépatite B (HBe) dans le sérum ou le plasma humain.
Résumé :
La présence de l'anticorps contre l'antigène viral de l'hépatite B e est employée comme indicateur pour (1) l'antigenemia tôt de HB avant la crête de la reproduction virale et (2) la convalescence tôt quand HBeAg a diminué au-dessous des niveaux décelables. Il est également utile de confirmer une séroconversion. La séroconversion de la positivité de HBeAg l'anti-HBe positivité indique un niveau réduit de virus infectieux parce que la reproduction de virus a diminué.
L'anti-HBe essai d'anticorps est un immunoessai concurrentiel d'enzymes dans lequel les anti-HBe anticorps des spécimens concurrencent une quantité constante anticorps conjugué par (HRP) de peroxydase de raifort d'anti-HBe pour un nombre limité de HBeAg dans le réactif neutralisant supplémentaire au puits. Le puits de microtitre est enduit des anticorps polyclonaux contre HBeAg comme receveur pour HBeAg. Un spécimen de sérum est ajouté aux puits de microtitre ainsi que l'anti-HBe anticorps conjugué par HRP aussi bien qu' HBeAg en réactif neutralisant. Après incubation, les anti-HBe anticorps dans le spécimen, si présent, concurrencent la quantité constante d'anti-HBe HRP-conjugué pour la quantité limitée de HBeAg se sont ajoutés dans les puits. Les conjugués non liés d'enzymes seront enlevés et la solution de substrat de chromogène contenant le peroxyde d'hydrogène est ajoutée aux puits pour le développement de couleur. Ainsi, la quantité d'anti-HBe limite HRP-conjuguée au puits est inversement proportionnelle la concentration du l'anti-HBe anticorps dans le spécimen. L'absorbance des contrôles et des spécimens est déterminée utilisant le lecteur de l'EIE avec la longueur d'onde réglée 450 nanomètre.
Régents fournis
1. Microtitre a enduit le plat (96 puits) – 1 aucun
2. conjugué de biotine d'humain, 1ml – 1 fiole
3. norme, 3200U/L, 0.5ml – 1 fiole
4. conjugué de Streptavidin HRP, - 6 ml
5. tampon de lavage (30X) – 20ml
6. diluant standard – 3ml
7. substrat A – 6ml
8. substrat B – 6ml
9. arrêtez la solution – 6ml
10. manuel d'instruction
EXAMINEZ LE PRINCIPE
Cette analyse est basée sur l'analyse d'immunosorbant enzyme-liée par sandwich (ELISA). Les échantillons contenant des anticorps contre le virus e de l'hépatite B réagit avec le virus enduit d'un préenduisage e de l'hépatite B d'antigène dans le puits. Après incubation, la biotine a marqué l'antigène (le virus d'hépatite B e) est ajouté dans les puits. Streptavidin-HRP est ajouté pour former un complexe immun. Après incubation, le lavage est fait pour enlever le complexe non lié. Le substrat de TMB est ajouté aux puits. La quantité de substrat hydrolysé est lue sur un lecteur de microplate et elle est directement proportionnelle la concentration des anticorps contre le virus E. de l'hépatite B.
PROCÉDURE D'ESSAIS
1. permettez tous les réactifs d'atteindre la température ambiante avant emploi.
2. distribuez une goutte (UL 50) de spécimen, contrôle positif aussi bien que contrôle négatif dans les puits respectifs.
3. ajoutez une goutte (UL 50) de conjugué d'enzymes chacun bien, suivie d'une goutte (UL 50) de régent neutralisant. Mélangez-les doucement en tourbillonnant le plat de microtitre sur le banc plat pendant 2 mn.
4. placez le plat de microtitre dans une boîte humidifiée et incubez 37o C pendant 60 mn.
5. Lavez chacun puits 6 fois en remplissant chacun bien de tampon dilué de lavage, puis en inversant le plat vigoureusement pour obtenir toute l'eau et en bloquant la jante de chacun bien sur le papier absorbant pendant quelques secondes.
6. ajoutez 1 goutte (UL 50) de la solution A de substrat chacun bien, puis ajoutez 1 goutte (UL 50) de la solution B de substrat chacun bien. Mélangez doucement et incubez la température ambiante pendant 15 mn.
7. l'inspection visuelle de la coloration dans chacun puits ou ajoutent une goutte (UL 50) de cesser la solution chacun bien pour arrêter la coloration. Lecteur vide de l'EIE avec un puits de contrôle vide et des valeurs alors lues d'O.D. de tous les échantillons 450 nanomètre.
Caractéristiques de fonctionnement :
Veuillez noter que cette validation est effectuée dans notre laboratoire et ne sera pas nécessairement reproduite dans votre laboratoire. Ces données ont été produites pour permettre l'utilisateur d'obtenir une prévision de l'analyse et les caractéristiques du kit et sont génériques en nature. Nous recommandons que l'utilisateur exécute au minimum ; l'analyse de transitoire et de récupération et l'analyse de linéarités de dilutional pour assurer des résultats de qualité. Pour une validation plus complète, l'utilisateur peut courir les protocoles comme proposé par nous ci-dessus ci-dessous de développer les paramètres pour que le contrôle de qualité soit employé avec le kit.
Sensibilité : Limite de détection : Elle est définie comme la plus basse concentration décelable correspondant un signal de moyen de “0" norme plus l'écart-type 2*. 10 répliques de “0" des normes ont été évaluées et le LOD s'est avéré 10 U/L.
Précision :
précision d'Intra-analyse : 3 échantillons avec le bas, moyen et de haut niveau humain HBeAb ont été examinés 20 fois d'un plat, respectivement.
précision d'Inter-analyse : 3 échantillons avec le bas, moyen et de haut niveau humain HBeAb ont été examinés de 3 plats différents, 8 répliques dans chaque plat. Cv (%) = Intra-analyse 100 de SD/mean X : Cv<10>
Ver1.0 5
LA NOUVELLE VIE CIE. MÉDICALE, LTD DE L'ORIENT. | |
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