Échantillon diagnostique de plasma de kits de la thyroxine T4 Elisa avec 2 chaînes standard de courbe

Essai de la thyroxine T4 ELISA, de grande précision, méthode de sandwich Elisa, pour la mesure quantitative

Nom de produit : Essai de la thyroxine T4 ELISA

Utilisation prévue :

Le kit de (T4) de thyroxine est conçu pour mesurer quantitativement le présent T4 dans le sérum, le plasma (EDTA et héparine), l'urine, les échantillons fécaux secs extraits, et le culturemedia de tissu. Ce kit mesure totalT4 dans le sérum, le plasma, et les échantillons fécaux extraits. T4 est des espèces indépendantes.

Résumé :

La thyroxine est l'hormone principale produite par la glande thyroïde. Les hormones thyroïdiennes, le triiodothyronine (T3) et la thyroxine (T4), sont des hormones basées sur tyrosine produites par la glande thyroïde qui sont principalement responsables du règlement du métabolisme. L'iode est nécessaire pour la production du T3 et du T4. Une insuffisance d'iode mène la production diminuée du T3 et du T4, agrandit le tissu thyroïde et causera la maladie connue sous le nom de goître. La forme principale d'hormone thyroïdienne dans le sang est une thyroxine (T4), qui a une plus longue demi vie que le T3. Le rapport de T4 au T3 déchargé dans le sang est approximativement 20 1. T4 est converti en T3 actif (trois quatre fois plus efficace que T4) dans des cellules par les deiodinases (5' - iodinase). Ceux-ci sont encore traités par décarboxylation et deiodination pour produire l'iodothyronamine (T1a) et le thyronamine (T0a). Chacun des trois isoforms des deiodinases sélénium-contient des enzymes, ainsi le sélénium diététique est essentiel pour la production T3. L'hypothyroïdisme est la condition qui résulte de la sous-production de la thyroxine par la glande thyroïde l'un ou l'autre parce que la glande est naturellement underactive ou parce que la thérapie ou la chirurgie de radio-iode pour une glande trop active a eu comme conséquence l'underactivity. La thyroxine est prise pour remplacer l'insuffisance qui existe dans de telles situations et donc pour reconstituer l'activité métabolique normale. La production d'hormone thyroïdienne est réglée par l'intermédiaire de la modulation pituitaire de (TSH) de thyrotropine de la sécrétion de prohormone de (T4) de thyroxine par la glande thyroïde et le règlement de la production active de (T3) de triiodothyronine dans les tissus périphériques par l'intermédiaire des événements métaboliques influençant l'enzyme.

Principe d'essai :

Le kit offre 2 gammes standard de courbe. Pour des échantillons de sérum et de plasma, nous recommandons d'employer le µL 10 des normes ou des échantillons. La gamme de concentration d'analyse pour T4 sera de 50 ng/ml 0,781 ng/ml. Pour des échantillons d'urine, nous recommandons d'employer alternativement le µL 100 des normes ou prélevons des concentrations de T4 qui s'étendent de 4 ng/ml 0,0625 ng/ml.

Une solution T4 courante est fournie pour produire des courbes standard pour l'analyse et tous les échantillons devraient être lus outre de la courbe standard. Des normes ou les échantillons dilués sont introduits la pipette dans un plat de microtitre clair enduit d'un anticorps pour capturer des anticorps de souris. Un conjugué de T4-peroxidase est ajouté aux normes et aux échantillons dans les puits. La réaction obligatoire est lancée par l'addition d'un anticorps monoclonal toT4 chacun bien. Après qu'une incubation d'heure le plat soit lavée et le substrat est ajouté. Le substrat réagit avec le conjugué attaché de T4-peroxidase. Après une incubation courte, la réaction est arrêtée et l'intensité de la couleur produite est détectée dans un lecteur de plat de microtitre capable de mesurer la longueur d'onde 450nm. La concentration du T4 dans l'échantillon est calculée, après fabrication de la correction appropriée pour la dilution de l'échantillon, utilisant le logiciel disponible avec la plupart des lecteurs de plat.

Composants de kit

1. Microtiterwells, 12 x 8 (cassez part) bandes, 96 puits ; Wells a enduit de l'antigène de Treponema pallidum. (1 support y compris de bande et 1 aluminium de couverture)
2. *** De Pos. Control, 1 fiole, 1,0 ml, de prête employer ; coloré chapeau jaune et rouge.
3. Négatif. Commandez le ***, 1 fiole, 2,0 ml, de prête employer ; coloré chapeau jaune et jaune.
4. *** De contrôle de coupure, 1 fiole, 1,0 ml, de prête employer ; coloré chapeau jaune et noir.
5. Conjugué d'enzymes **, 1 fiole, 13 ml, de prête employer,
6. Solution de substrat, 1 fiole, 14 ml, de prête employer, Tetramethylbenzidine (TMB).
7. Arrêtez la solution, 1 fiole, 14 ml, de prête employer, contenez 0,2 moles/l H2SO4, évitez le contact avec la solution d'arrêt. Elle peut causer des irritations cutanées et des brûlures.
8. Solution de lavage *, 1 fiole, 30 ml (20X concentré pour 600 ml), le ± 0,2 de pH 7,2 voient la préparation de „des réactifs « .

* contient 0.03 % ProClin 300

** contient 0.03 % ProClin sulfate de gentamicine de 300 + de 0.01 %

le *** contient 0.03 % ProClin 300 + 0.015 % 5 bromo-5-nitro-1,3-dioxane (BND) + 0.010 % 2 methyl-2H-isothiazol-3-one (le MIT)

PROCÉDURE D'ANALYSE

Chacun couru doit inclure une courbe standard.

1. Fixez le nombre désiré de puits de microtitre dans le support de cadre.

2. Distribuez le µL 10 de chaque norme, contrôle et échantillons avec de nouvelles astuces jetables dans les puits appropriés.

3. Incubez pendant 5 minutes la température ambiante (18 °C – °C) 25.

4. Distribuez le conjugué d'enzymes de 100 µL dans chacun bien.

Mélangez complètement pendant 10 secondes. Il est important d'avoir un mélange complet dans cette étape.

5. Incubez pendant 80 minutes la température ambiante (18 °C – °C) 25.

6. Secouez vivement le contenu des puits.

Rincez les puits 5 fois avec la solution diluée de lavage (µL 400 par puits). Frappez les puits brusquement sur le papier absorbant pour enlever les gouttelettes résiduelles.

Note importante :

La sensibilité et la précision de cette analyse est nettement influencée par la représentation correcte de la procédure de lavage !

1. Ajoutez le µL 100 de la solution de substrat chacun bien.

2. Incubez pendant 10 minutes la température ambiante (18 le °C – le °C) 25 incubez pendant 7 minutes la température ambiante (°C 26 – le °C) 29 incubent pendant 5 minutes la température ambiante (plus °C) de 29

3. Arrêtez la réaction enzymatique en additionnant 100 que le µL de arrêtent la solution chacun bien.

4. Déterminez l'absorbance (OD) de chacun bien 450 au ± 10 nanomètre avec un lecteur de plat de microtitre.

On lui recommande que les puits soient lus d'ici 10 minutes après avoir ajouté la solution d'arrêt.