Dépouillez le kit du rat ELISA de plat pour une analyse de présence de Disintegrin/Metalloprotease 30

Numéro de type:Cat.No E0170Ra
Point d'origine:Shanghai, Chine.
Quantité d'ordre minimum:négociation
Capacité d'approvisionnement:Western union, T/T
Délai de livraison:1-3 Business Day, commande en gros d'ici une semaine
Détails d'emballage:Enveloppé avec le paquet de vessie de glace et de mousse de styrol
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Adresse: Bâtiment international de #1008.Junjiang. 228 Ningguo Rd. Yangpu Dist. Changhaï. 200090. La Chine
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Détails du produit

96 kit de la croissance Factor-23 ELISA de fibroblaste de spécificité de rat de Wells haut pour la recherche

 

Cat.No E0170Ra

Chaîne standard de courbe : 5pg/ml - 1500pg/ml

Sensibilité : 2.56pg/ml

Taille : 96 puits

Stockage : Stockez les réactifs 2-8°C. pour le stockage de six mois fini se rapportent la date d'échéance le gardent aux cycles de dégel répétés Avoid de -20°C. Si différents réactifs sont ouverts on lui recommande que le kit soit employé dans un délai de 1 mois.

le produit de *This sert pour l'usage de recherches seulement, pas des procédures de diagnostic. Il est recommandent fortement de lire cette instruction entièrement avant emploi.

 

Précision

La précision d'Intra-analyse (précision dans une analyse) trois échantillons de concentration connue ont été examinées d'un plat pour évaluer la précision d'intra-analyse.

La précision d'Inter-analyse (précision entre les analyses) trois échantillons de concentration connue ont été examinées dans des analyses distinctes pour évaluer la précision d'inter-analyse.

Cv (%) = SD/mean X 100

Intra-analyse : Cv<8>

Inter-analyse : Cv<10>

 

Utilisation prévue

Ce kit de sandwich est pour la détection quantitative précise de la croissance Factor-23 de fibroblaste de rat (également connu sous le nom de FGF-23) en sérum, plasma, surnageants de culture cellulaire, lysates de cellules, homogénats de tissu.

 

Précautions

  • Avant l'utilisation, le kit et l'échantillon devraient être chauffés naturellement la température ambiante 30 minutes.
  • Cette instruction doit être strictement suivie dans l'expérience.
  • Une fois que le nombre désiré de bandes a été enlevé, rescellez immédiatement le sac pour protéger le rester contre la détérioration. Couvrez tous les réactifs si non utilisable.
  • Make sure introduisant la pipette l'ordre et le taux d'addition de bien--bien en introduisant la pipette des réactifs.
  • Les astuces de pipette et le scelleur de plat disposition devraient être propres et jetables pour éviter la contamination transversale.
  • Évitez d'employer les réactifs de différents groupes ensemble.
  • La solution B de substrat est sensible la lumière, n'exposent pas la solution B de substrat pour s'allumer pendant longtemps.
  • Arrêtez la solution contient l'acide. Veuillez porter l'oeil, la main et la protection de la peau en employant ce matériel. Évitez le contact de la peau ou des muqueuses avec du réactif de kit.
  • Le kit ne devrait pas être employé au del de la date d'échéance.

 

Collection de spécimen

Le sérum permettent au sérum de coaguler pendant 10-20 minutes la température ambiante. Centrifugeuse 2000-3000 t/mn pendant 20 minutes.

 

Le plasma rassemblent le plasma utilisant l'EDTA ou l'héparine comme anticoagulant. Centrifugez les échantillons pendant 15 minutes 2000-3000 t/mn 2 - 8°C d'ici 30 minutes de collection.

 

L'urine se rassemblent par le tube stérile. Centrifugeuse 2000-3000 t/mn pendant approximativement 20 minutes. En rassemblant le fluide liquide et céphalo-rachidien pleuroperitoneal, suivez svp les procédures mentionnées ci-dessus.

 

Le surnageant de culture cellulaire se rassemblent par les tubes stériles en examinant sécrétez les composants. Centrifugez 2000-3000 t/mn pendant approximativement 20 minutes. Rassemblez les supernatants soigneusement. En examinant les composants dans la cellule, employez PBS (pH 7.2-7.4) pour diluer la suspension de cellules la concentration en cellules d'approximativement 1 million/ml. Endommagez les cellules pendant les cycles gel-dégel répétés pour laisser les composants intérieurs. Centrifugez 2000-3000 t/mn pendant approximativement 20 minutes.

 

Tissus de rinçage de tissu dans PBS (pH 7,4) pour enlever le sang excédentaire complètement et peser avant homogénéisation. Hachez les tissus et homogénéisez-les dans PBS (pH7.4) avec un homogénisateur en verre sur la glace. Dégelez 2-8°C ou gelez la centrifugeuse de -20°C. 2000-3000 t/mn pendant approximativement 20 minutes.

 

Notez

  • Des concentrations d'échantillon devraient être prévues avant d'être employée dans l'analyse. Si la concentration d'échantillon n'est pas dans la marge de la courbe standard, les utilisateurs doivent nous contacter pour déterminer l'échantillon optimal pour leurs expériences particulières.
  • Des échantillons employer d'ici 5 jours devraient être stockés aux échantillons 2-8°C. devraient aliquoted ou doivent être stockés -20°C dans un délai de 1 mois ou -80°C dans les 6 mois. Avoid a répété les cycles gel-dégel.
  • Des échantillons devraient être apportés la température ambiante avant de commencer l'analyse.
  • Centrifugeuse pour rassembler l'échantillon avant emploi.
  • Des échantillons contenant NaN3 ne peuvent pas être examinés pendant qu'il empêche l'activité de la peroxydase (HRP) de raifort sauvage.
  • Rassemblez les supernatants soigneusement. Quand les sédiments se sont produits pendant le stockage, la centrifugation devrait être effectuée encore.
  • Le Hemolysis peut considérablement effectuer la validité des résultats d'essai. Faites attention pour réduire au minimum le hemolysis.

le *Sample ne peut pas être dilué avec ce kit. En raison le du matériel nous employons pour préparer le kit, l'interférence de matrice témoin peut faussement diminuer la spécificité et l'exactitude de l'analyse.

 

Procédure d'analyse

1. Préparez tous les réactifs, solutions étalons et échantillons comme instruits. Apportez tous les réactifs la température ambiante avant emploi. L'analyse est exécutée la température ambiante.

2. Déterminez le nombre de bandes requises pour l'analyse. Insérez les bandes dans les cadres pour l'usage. Les bandes inutilisées devraient être stockées 2-8°C.

3. Ajoutez la norme 50μl la norme bien. Note : N'ajoutez pas l'anticorps la norme bien parce que la solution étalon contient l'anticorps biotinylated.

4. Ajoutez l'échantillon 40μl aux puits témoin et puis ajoutez l'anticorps de 10μl anti-FGF-23 aux puits témoin, puis ajoutez le streptavidin-HRP 50μl aux puits témoin et aux puits standard (puits de contrôle non vide). Mélangez bien. Couvrez le plat de scelleur. Incubez 60 minutes 37°C.

5. Enlevez le scelleur et lavez le plat 5 fois avec le tampon de lavage. Imbibez de les puits au moins le tampon de lavage de 0,35 ml pour 30 secondes 1 minute pour chaque Washington. Pour le lavage automatisé, aspirez tous les puits et lavez 5 fois avec le tampon de lavage, remplissant au-dessus du niveau jaillit avec le tampon de lavage. Épongez le plat sur les serviettes de papier ou tout autre matériel absorbant.

6. Ajoutez la solution A du substrat 50μl chacun puits et puis ajoutez la solution B du substrat 50μl chacun bien. Incubez le plat couvert de nouveau scelleur pendant 10 minutes 37°C dans l'obscurité.

7. Ajoutez 50μl arrêtent la solution chacun bien, la couleur bleue changera en jaune immédiatement.

8. Déterminez la densité optique (valeur d'OD) de chacun puits immédiatement utilisant un ensemble de lecteur de microplate 450 nanomètre moins de 10 menuets après avoir ajouté la solution d'arrêt.

 

Referances

« Expression rénale de FGF23 dans la maladie rénale progressive du diabète et l'effet de l'inhibiteur du CÆ. »

Zanchi C., Locatelli M., Benigni A., Corna D., Tomasoni S., Rottoli D., Gaspari F., Remuzzi G., Zoja C.

Plos One 8 : e70775-e 70775(2013)

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