Canard 96 Wells/Kit Sensitivity de porc de poulet d'Olaquindox ELISA Diagnostic Method Test For 0,2 Ppb

Olaquindox ELISA Test Kit pour le canard 96 Wells/Kit Sensitivity de porc de poulet 0,2 ppb

1. Principe

Ce kit d'essai est basé sur l'immunoessai concurrentiel d'enzymes pour l'ofOlaquindox de détection dans l'échantillon. Les antigènes de accouplement sont enduits d'un préenduisage sur les rayures micro-bien. TheOlaquindox dans l'échantillon et les antigènes de accouplement enduits d'un préenduisage sur les rayures micro-bien concurrencent pour l'anti-Olaquindox anticorps. Après que l'addition du conjugué d'enzymes, le substrat de TMB soit ajoutée pour la coloration. La valeur de la densité optique (OD) de l'échantillon a une corrélation négative avec l'Olaquindox dans elle. Cette valeur est comparée la courbe standard et la concentration d'Olaquindox est plus tard obtenue.

2. Spécifications techniques

Sensibilité : 0,2 ppb
La température d'incubateur : 37℃
Temps d'incubateur : 30min~30min~15min

Limite de détection :
Porc, ppb du poulet 0,2
Ppb porcin du foie 1
Alimentation 20ppb

Taux de réaction croisée :
Olaquindox100%
Carbadox<7>

Taux de récupération :
Tissue95%±25%
Feed70%±20%

3. Composants

4. Matériaux requis mais non fournis

1) Équipements : le lecteur de microplate (450nm/630nm), homogénisateur, oscillateur, centrifugeuse, mesurant introduit la pipette, dispositif d'azote-séchage et équilibre (une sensibilité réciproque de 0,01 g), incubateur.
2) Micropipettors : 20 canal unique 200µL et 100 1000µL et 30~300µl multicanal ;
3) réactifs : Acétonitrile, n-hexane, Al2O3

5. Traitement préparatoire d'échantillon

Instructions
Les points suivants doivent être traités avant le traitement préparatoire du genre d'échantillon :
1) seulement les astuces jetables peuvent être employées pour les expériences et les astuces doivent être changées une fois utilisées pour absorber différents réactifs ;
2) avant l'expérience, chaque ustensile expérimental doit être vérifié pour être propre et devrait re-être nettoyé s'il y a lieu, afin d'éviter la contamination qui interfère les résultats expérimentaux.

Préparation témoin
1) solution de Sampleredissolving : Dilute2× a concentré redissoudre la solution avec de l'eau désionisé au 1:1

5.1Tissues (poulet, porc/foie)
1. prenez 2± 0.05g de l'échantillon homogénéisé dans le tube centrifuger 50ml, add10mLAcetonitrile (sans eau), secouent correctement for2min. Centrifugeuse above4000r/ minute la température ambiante (20 - 25℃) pour 10min.
2. surnageant, coup sécher avec de l'azote ou air de Take5mL 56℃.
3. dissolvez le residuesin sec 2mlN-hexane, add1mL de la solution redissolvante diluée, mixthoroughly pour 30s, centrifugeuse above4000r/ minute la température ambiante (20-25℃) for5min. Enlevez la phase de -layerN-hexane.
4. prenez 50 le µL pour l'analyse.
Pli de la dilution de l'échantillon : 1

5.2Feed
1. pesez 1± 0,05 g a homogénéisé l'échantillon dans le tube centrifuger, ajoutent 2gAl2O3, puis 5mlAcetonitrile, shakeviolently for3min, centrifugeuse above4000r/ minute 25℃ for5min ;
2. Take50ulsupernatant, mélange avec 950ul a dilué redissoudre solutionevenly, prend le liquide de la -couche 50µL pour l'analyse.
Pli de la dilution de l'échantillon : 100

6. Procédures d'ELISA

6,1 instructions
1) apportent tous les réactifs et bandes micro-bien la température ambiante (20-25℃) avant emploi ;
2) retour tous les réactifs 2-8℃ juste après l'utilisation ;
3) la reproductibilité de l'analyse d'ELISA, dans une large mesure, dépend de la cohérence du lavage de plat. L'opération correcte du lavage de plat est le point clé des procédures d'ELISA ;
4) pour l'incubation aux températures constantes, tous les échantillons et réactifs doivent éviter l'exposition la lumière, et chaque microplate devrait être scellé par la membrane de couverture.

6,2 mode opératoire
1) sortent tous les réactifs exigés et gardent la température ambiante (20-25℃) pour au moins 30min. Notez que chaque réactif doit être secoué et mélangé bien avant l'utilisation ;
2) prennent le cadre désiré de bande et de plat de microwell. Des microplates inutilisés devraient être rescellés et stockés 2-8°C ;
3) préparation de solution : Les 40 ml dilués de 20× ont concentré le tampon de lavage avec de l'eau désionisé 1h19 1 (1 part de tampon de lavage concentré par 20× + 19 parts de l'eau désionisée), ou préparent en tant que nécessaire ;
4) numérotation : Numérotez les microwells selon les échantillons et les solutions étalons ; chaque échantillon et solution étalon devraient être faits en double ; enregistrez leurs positions ;
5) ajoutent le µL 50 de l'échantillon ou de la solution étalon pour séparer des puits, et puis ajoutent le µL 50 de la solution de travail d'anticorps chaque puits. Secouez doucement pour se mélanger bien, couvrez le microplate de film de couverture, et incubez 37°C pour la minute 30 ;
6) lavage le microplate 4-5 fois avec 250 µL/well de tampon de lavage ; imbibez les puits dans le tampon de lavage pendant 15-30 secondes, et tapotez sec avec le papier absorbant (si des bulles d'air sont trouvés après le tapement, découpé avec une astuce propre de pipette)) ;
7) ajoutent le µL 100 du conjugué d'enzymes chaque puits, secousse et mélange doucement, couverture le microplate avec un film de couverture, et incubent 37°C pour la minute 30 ; versez le liquide du puits, lavez le microplate avec le tampon de lavage, et continuez étape 6).
8) développement de couleur : Ajoutez le µL 50 le µL de la solution du substrat A et 50 de la solution de B chaque puits. Secouez doucement et mélange, et incubez 37°C pendant 15 minutes dans l'obscurité pour le développement de couleur ;
9) analyse : Ajoutez le µL 50 de la solution d'arrêt chaque puits. Secouez doucement pour se mélanger. Placez la longueur d'onde du lecteur de microplate 450nm pour déterminer la valeur d'OD. (On lui recommande de lire la valeur d'OD 450/630nm double longueur d'onde d'ici 5 minutes).

7. Jugement de résultat

Il y a deux méthodes pour juger les résultats ; le premier est le jugement approximatif, alors que le deuxième est la détermination quantitative. Note que la valeur d'OD de l'échantillon a une corrélation négative avec l'ofOlaquindox satisfait.

7,1 détermination qualitative
La gamme de concentration (ng/mL) peut être obtenue partir de la comparaison la valeur moyenne d'OD de l'échantillon avec cela de la solution étalon. Supposer que la valeur d'OD de l'échantillonⅠ est 0,3, et ce du Ⅱ témoin est 1,0, alors que ceux des solutions étalons sont en tant que ce qui suit : 2,243 pour 0ppb, 1,816 for0.2ppb, 1,415 for0.6ppb, 0,74 for1.8ppb, 0,313 for5.4ppb et 0,155 for16.2ppb, en conséquence la gamme de concentration du Ⅰ is5.4 to16.2ppb témoin, et celle du Ⅱ is0.6 témoin 1.8ppb.

7,2 détermination quantitative
Les valeurs moyennes des valeurs d'absorbance est équivalente au pourcentage de la valeur moyenne d'OD (b) de l'échantillon et de la solution étalon divisés par la valeur d'OD (B0) de la première solution étalon (0 normes) et plus tard multipliés d'ici 100%, c.--d.,

Valeur de moyenne de B-the (doubles puits) OD de l'échantillon ou de la solution étalon
Valeur de la moyenne OD de B0-the des 0 solutions étalons de ng/mL
Dessinez la courbe standard avec les pourcentages d'absorption des solutions étalons et les valeurs de semilogarithm des solutions étalons d'Olaquindox (ng/mL) comme y et axe des abscisses, respectivement. Lisez la concentration correspondante de l'échantillon provenant de la courbe standard en incorporant son pourcentage d'absorption dans la courbe standard. La valeur en résultant est plus tard multipliée par le pli correspondant de dilution, de ce fait finalement obtenant la concentration d'Olaquindox dans l'échantillon.
Utilisant analysant le logiciel professionnel de ce kit sera plus commode pour l'analyse précise et rapide d'un grand nombre d'échantillons. (Svp contactez-nous pour ce logiciel)

8. Précautions

1. La température ambiante en-dessous du ℃ 25 ou la température des réactifs et des échantillons n'étant pas retourné la température ambiante (℃ 20-25) mènera une valeur standard plus basse d'OD
2. la sécheresse du microplate dans le procédé de lavage sera accompagnée des situations comprenant les courbes standard non linéaires et la reproductibilité indésirable
3. le mélange chaque réactif et mélange de la réaction également et laver le microplate complètement, autrement l sera la reproductibilité indésirable
4. La solution d'arrêt est la solution acide sulfurique de 2 M, évitent d'entrer en contact avec la peau ;
5. mettez le microplate inutilisé dans un sac d'automatique-cachetage pour le resceller. La substance étalon et la couleur sans couleur anciennes est sensible la lumière, et elles ne peuvent pas être directement exposées ainsi la lumière
6. N'employez pas le kit dépassant sa date d'échéance. L'utilisation des réactifs dilués ou frelatés des kits mènera aux variations de la sensibilité et des valeurs de détection d'OD. N'échangez pas les réactifs des kits de différents numéros de lot pour employer
7. jetez la solution de coloration avec n'importe quelle couleur qui indique la dégénérescence de cette solution. La valeur de détection des 0 solutions étalons de moins de 0,5 indique sa dégénérescence
8. La température optima de réaction est le ℃ 37, et les températures trop élevées ou si basses auront comme conséquence les variations de la sensibilité de détection et des valeurs d'OD.

9. Date de stockage et d'échéance

Stockage : magasin au ℃ 2-8, non congelé.
Date d'échéance : 12 mois ; la date de la production est sur la boîte.
Note : Si l'emballage sous vide du microplate a la fuite, il est encore valide pour employer, n'affectent pas le résultat d'essai, soit de détendre pour employer.

Q1 : Quand sera-t-il embarqué ?
A1 : Nous embarquerons les marchandises pour vous dès que possible dans un délai de 7 jours ouvrables après réception du paiement. (En cas de facteurs externes tels que l'épidémie, la livraison peut être retardée)

Q2 : Soutient-il OEM/ODM ?
A2 : Il peut être soutenu, mais la quantité spécifique doit être plus de 100 000 morceaux, qui est commode pour les produits adaptés aux besoins du client.

Q3 : Comment votre usine va-t-elle en termes de contrôle de qualité ?
A3 : Nous avons nationalement certifié ISO9001 et ISO13485. Notre processus de fabrication se conforme aux procédures standard pour assurer la qualité du produit optima.

Q4 : Comment fournir le service après-vente ?
A4 : Nous fournissons le service après-vente technique en ligne professionnel. Nous pouvons te fournir des conseils faces face par l'intermédiaire de la vidéo, du téléphone, etc.

Q5 : Quelle est la méthode de paiement ?
A5 : Nous recevons le paiement par T/T.

Q6 : Comment se transporter ?
A6 : Choisissez la meilleure méthode de expédition pour vous en obtenant des citations de nos beaucoup de transporteurs coopératifs, et également de bateau selon vos conditions.