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Kit ELISA d'anticorps contre la pullorose (PD) et la typhoïde aviaire (FT) 96 puits/kit
1. Utilisation
Ce kit est utilisé pour détecter les anticorps de la pullorose (PD)
et de la typhoïde aviaire (FT) dans le sérum de poulet, afin
d'aider au diagnostic sérologique des poulets infectés.
2. Principe
Le kit ELISA d'anticorps contre la maladie pullorale (PD) et la
typhoïde aviaire (FT) est basé sur un dosage immunoenzymatique
indirect (ELISA indirect). L'antigène est déposé sur des
plaques.Lorsqu'un échantillon de sérum contient des anticorps
spécifiques contre le virus, ils se lient l'antigène sur les
plaques.Laver les anticorps non liés et les autres
composants.Ajouter ensuite un conjugué enzymatique spécifique.Après
incubation et lavage, ajouter le substrat TMB.Une réaction
colorimétrique apparaîtra, mesurée par un spectrophotomètre (450
nm).
3. Réactifs
Bandelettes de microtitrage revêtues d'antigène PD&FT | 1 pièce (96 puits) |
Conjugué enzymatique | 1 bouteille (11 ml/bouteille) |
10× solution de lavage | 1 bouteille (50 ml/bouteille) |
Substrat A/B solution | 1 tube chacun (6 mL/tube) |
Dilution de l'échantillon | 1 bouteille (50 ml/bouteille) |
Solution d'arrêt | 1 tube (6 ml/tube) |
Contrôle négatif | 1 tube (800μL/tube) |
Contrôle positif | 1 tube (800μL/tube) |
Plaque de dilution de sérum | 1 pièce |
Film adhésif | 2 pièces |
Instruction | 1 pièce |
4. Matériel nécessaire mais non fourni
1) Micropipettes et embouts jetables : 0,5 μL ~
10 μL, 10 μL ~ 100 μL, 100 μL ~
1 000 μL
2) Incubateur 37 ℃
3) Eprouvette graduée : 500 ml
4) Lecteur de microplaques 96 puits
5) Eau distillée ou eau déminéralisée
6) Machine laver les biberons ou les microplaques
5. Préparation des échantillons
Prenez du sang total animal, faites du sérum selon les méthodes
habituelles, le sérum doit être clair, sans hémolyse.
6. Préparation du tampon de lavage
Remettre la solution de lavage température ambiante avant
utilisation, s'il y a des cristaux salés, agiter pour faire
dissoudre les cristaux, puis utiliser de l'eau distillée ou de
l'eau déminéralisée pour la diluer 10 fois.La solution de lavage
diluée peut être conservée 1 semaine 4 ℃.
7. Dilution de l'échantillon
Sur la plaque de dilution du sérum, diluer le sérum 1:99 avec la
dilution de l'échantillon (par exemple : 495 μL de
diluant d'échantillon + 5 μL de sérum)
Avis : Le contrôle négatif et le contrôle positif n'ont pas besoin
d'être dilués.Échangez la pointe après avoir prélevé l'échantillon
chaque fois, enregistrez la situation de l'échantillon sur la
plaque avec précision.Agiter l'échantillon uniformément avant de
l'ajouter.
8. Remarques
1) Tous les réactifs doivent être ajustés la température ambiante
et secouer uniformément avant utilisation, stocker 2-8 ℃ après
utilisation
2) Ne pas échanger les réactifs des kits de différents numéros de
lot utiliser.Éviter la pollution des réactifs lors de
l'utilisation.
3) La solution de substrat et d'arrêt peut avoir un excitant pour
la peau et les yeux, faites attention lors de l'utilisation.
4) Ne pas exposer le TMB (Substrat B) la lumière et éviter tout
contact avec des antioxydants.
5) Les puits doivent éviter l'humidité ou le contact avec l'eau
après le descellement (remettez la microplaque non utilisée dans le
sac avec le déshydrateur dans 2 8 ℃ bientôt)
6) Traiter raisonnablement tous les déchets avant de les jeter pour
éviter la pollution.
7) Respectez strictement les instructions pour obtenir le meilleur
résultat.Toutes les procédures, y compris le pipetage, le minutage
et le lavage, etc. doivent être précises.
8) La plaque de dilution du sérum est jetable, ne l'utilisez pas
pour la deuxième fois ;le volume MAX de celui-ci est de
300μL/puits.
9. Procédure ELISA
1) Prenez une microplaque pré-enduite (peut se desceller pour
plusieurs utilisations selon la quantité d'échantillon), ajoutez
100 μl de sérum dilué dans un puits, pendant ce temps, définissez 1
puits pour le contrôle négatif, le contrôle positif et les puits de
contrôle vierges séparément.Ajoutez 100 μl de contrôle
négatif/positif dans ses puits, ajoutez seulement 100 μl de
dilution d'échantillon dans les puits de contrôle blanc.Agiter
doucement (ne pas renverser), incuber 37℃ pendant 30 min.
2) Verser le liquide hors des puits, ajouter 250 μL de solution de
lavage diluée dans chaque puits, statique pendant 1 min,
verser.Répéter 3 fois, puis tapoter pour sécher sur du papier
absorbant.
3) Ajouter 100 μL de conjugué enzymatique ( l'exception des
puits vides) chaque puits et incuber 37 ℃ pendant 30 min.
4) Répétez l'étape 2 (lavage).N'oubliez pas de tapoter pour sécher
sur du papier absorbant en dernier lieu.
5) Ajoutez 50 μL de substrat A, puis de substrat B (50 μL) chaque
puits, mélangez correctement, réagissez pendant 10 min 37 ℃ dans
l'obscurité.
6) Ajouter 50 μL de solution d'arrêt dans chaque puits et mesurer
le résultat dans les 10 min.
10. Résultats
Réglez zéro pour le puits vierge et testez la valeur A450nm (630 nm
comme référence) sur le lecteur de microplaques.Les conditions pour
que le test soit tenable sont que la valeur A450nm des puits de
contrôle positif soit supérieure ou égale 0,5 et que la valeur
A450nm des puits de contrôle négatif soit inférieure 0,15.Si le
test est invalide, l'opération est douteuse, retestez et observez
attentivement tous les réactifs.
Si la valeur A450 de l'échantillon est supérieure 0,2+ absorbance
de la moyenne du contrôle négatif, elle est jugée positive ;et
si moins de 0,2+ absorbance de la moyenne du témoin négatif,
négatif.Si l'absorbance de la moyenne du contrôle négatif est
inférieure 0,05, calculer comme 0,05
Spécifications : 96 puits/kit.
Date de péremption : 12 mois.
Stockage : Stockage 2-8℃, dans l'obscurité.
Q1 : Combien de temps vous faudra-t-il pour expédier ?
A1 : généralement expédié sous 7 jours ouvrables.
Q2 : prenez-vous en charge OEM/ODM ?
A2 : peut être pris en charge.Nous pouvons personnaliser en
fonction de vos besoins spécifiques et de quantités spécifiques.
Q3 : Comment se porte votre usine en termes de contrôle qualité ?
A3: Nous avons la certification ISO9001 et la certification
ISO13485, jusqu' présent tout le processus de production, nous
avons des règles standard, nous nous conformons au comportement et
aux lois pertinentes du gouvernement.
Q4 : Le service après-vente est-il garanti ?
A4: Nous fournissons un service après-vente technique en ligne
professionnel.Si le produit échoue pendant l'expérience, nous
pouvons fournir
conseils personnalisés par téléphone, vidéo et autres formulaires.
Q5 : Quelle est votre quantité minimum de commande ?
A5 : 1Kit.
Q6 : Quelle est la méthode d'expédition ?
A6: Il peut être expédié par exprès (FEDEX, UPS, DHL, EMS, etc.) ou
par voie aérienne et terrestre. Veuillez confirmer avec nous avant
de passer une commande.