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Anticorps aviaire ELISA Kit de virus de la maladie de Marek pour la volaille 96 Wells/kit
1. Utilisation
Ce kit est employé pour détecter l'anticorps aviaire du virus de la maladie de Marek (MDV) en sérum de poulet, évalue le statut d'anticorps du vaccin aviaire de la maladie de Marek dans des fermes de poulet, et l'aide dans le diagnostic des poulets sérum-infectés.
2. Principe
L'anticorps aviaire ELISA Kit de la maladie du Marek est basé sur
un immunoessai indirect d'enzymes (ELISA indirect). L'antigène
purifié de MDV est enduit du plat. Pour la détection, un
échantillon dilué de sérum est ajouté, et après incubation, si
l'échantillon de sérum contient les anticorps spécifiques contre le
virus de DM, ils lieront l'antigène enduit du plat. Anticorps non
lié de lavage et d'autres composants. Un conjugué spécifique
d'enzymes est alors ajouté, qui liera la combinaison
d'antigène-anticorps du plat. Après incubation et lavage, conjugué
non lié d'enzymes d'écart ; ajoutez le substrat de TMB. Une
réaction colorimétrique se produit, arrête la solution est ajoutée,
et la valeur d'OD est mesurée avec un spectrophotomètre (450
nanomètre).
3. Réactifs
1 | L'antigène de DM a enduit des bandes de microtitre | morceaux de 1/2 | 7 | Arrêtez la solution | 6/11 ml |
2 | EnzymeConjugate | 11/21 ml | 8 | Contrôle négatif | 0.8/1.6 ml |
3 | solution du lavage 10× | 50/100 ml | 9 | Positivecontrol | 0.8/1.6 ml |
4 | Solution du substrat A | 6/11 ml | 10 | Plat de dilution de sérum | morceaux de 1/2 |
5 | SubstrateBsolution | 6/11 ml | 11 | Film adhésif | 2/4 morceau |
6 | Dilution d'échantillon | 50/100 ml | 12 | Instruction | 1 morceau |
4. Matériaux requis mais non fournis
1) Micropipettors et astuces jetables : 0.5μL~10μL, 10μL~100μL,
100μL~1000μL
2) incubateur de 37 ℃
3) tube mesureur : 500 ml
4) lecteur de microplate de 96 puits
5) eau distillée ou eau deionied
6) bouteille ou machine laver de microplate
5. Préparation témoin
Prenez le sang total animal, faites le sérum selon des méthodes
régulières, le sérum devrait être clair, n'a aucun hemolysis.
6. Préparation de tampon de lavage
La solution de lavage de retour la température ambiante avant
emploi, s'il y a les cristaux salés, secouent pour faire les
cristaux se dissoudre, emploient alors l'eau distillée ou l'eau
désionisée pour la diluer 10 fois. La solution de lavage diluée
peut stocker pour 1 semaine au ℃ 4.
7. Dilution d'échantillon
Au plat de dilution de sérum, sérum dilué 1:99 avec la dilution
d'échantillon (par exemple : diluant témoin 495μL + sérum 5μL)
Avis : Le contrôle négatif et le contrôle positif n'ont pas besoin
de dilué. Astuce d'échange après avoir pris l'échantillon chaque
fois, disque la situation de l'échantillon du plat exactement.
Secouez l'échantillon même avant de l'ajouter.
8. Notes
1) Tous les réactifs devraient être retournés la température ambiante
et être secoués bien avant l'utilisation, et être stockés l'après
utilisation 2-8°C
2) ne remplacent pas des réactifs dans les kits par différents
numéros de lot. Évitez la contamination de réactif pendant
l'utilisation.
3) les substrats et les solutions d'arrêt peuvent irriter la peau
et les yeux, ainsi précaution d'utilisation.
4) n'exposent pas TMB (substrat B) pour allumer et éviter le
contact avec des antioxydants.
5) après ouverture du trou, le soin devrait être pris pour empêcher
le trou de devenir humide ou en contact avec l'eau (remettre le
microplate inutilisé dans le sac et utiliser un déshydrateur 2~8°C)
6) correctement avoir tous les déchets avant le dumping pour éviter
la contamination.
7) suivent les instructions exactement pour les meilleurs
résultats. Toutes les procédures comprenant introduire la pipette,
synchronisation et laver doivent être précises.
8) le plat de dilution de sérum est pour usage unique, svp ne
réutilisent pas ; son volume maximum est 300μL/well.
9. Procédure d'ELISA
1) Prenez un microplate enduit d'un préenduisage (qui peut être ouvert
et des périodes multiples utilisées selon le volume témoin),
ajoutez le μL 100 du sérum dilué chaque puits, et placez un bien
pour le contrôle négatif, le contrôle positif et le contrôle vide.
Ajoutez le µL 100 le µL de contrôles négatifs/positifs leurs puits
et 100 du diluant témoin seulement aux puits de contrôle vide.
Secouez doucement (ne renversez pas) et incuber 37°C pendant 30
minutes.
2) versent le liquide dans les puits, ajoutent le μL 300 de la
solution de lavage diluée chaque puits, ont laissé le support pour
1 minute, et versent. Répétez 3 fois, puis tapotez sec sur le
papier absorbant.
3) ajoutent le μL 100 du conjugué d'enzymes chaque puits et
incubent 37°C pendant 30 mn.
4) étape 2 (lavage) de répétition. Rappelez-vous enfin de tapoter
sec sur le papier absorbant.
5) ajoutent le μL 50 du substrat A chacun bien, ajoutent alors le
substrat B (μL 50), le mélange bien, et réagissent 37°C pour la
minute 10 dans l'obscurité.
6) ajoutent le μL 50 de la solution d'arrêt chaque puits, et
mesurent le résultat d'ici 10 minutes.
10. Résultats
Placez zéro pour le puits vide, et examinez la valeur d'A450nm (630
nanomètre comme référence) sur le microplate-lecteur. Les
conditions pour que l'essai soit défendable sont que la valeur de
l'A450nm des puits positifs de contrôle est supérieur ou égal 0,6,
et la valeur de l'A450nm des puits négatifs de contrôle est moins
de 0,15. Si l'essai est invalide, l'opération est dans le doute,
contre-essai et observe tous les réactifs soigneusement.
Si la valeur de l'A450 de l'échantillon est plus grande que 0,2+
absorbances de moyen négatif de contrôle, elle est jugée être
positive ; et si moins de 0,2+ absorbances de moyen négatif de
contrôle, négatives. Si l'absorbance du moyen négatif de contrôle
est moins de 0,05, calculez en tant que 0,05
Caractéristiques : 96 puits kit ou 96*2/kit de puits/.
Date d'échéance : 12 mois.
Stockage : Stockant 2-8℃, dans l'obscurité.
Q1 : Combien de temps prendra-t-il pour que vous transportiez-vous
?
A1 : Habituellement bateaux dans un délai de 7 jours ouvrables.
Q2 : Soutenez-vous OEM/ODM ?
A2 : peut être soutenu. Nous pouvons adapter aux besoins du client
selon les vos besoins spécifiques et quantités spécifiques.
Q3 : Comment votre usine va-t-elle en termes de contrôle de qualité
?
A3 : Nous avons la certification ISO9001 et ISO13485 la
certification, jusqu'ici tout le processus de fabrication, nous
avons des règles standard, nous nous conformons au comportement et
aux lois appropriés du gouvernement.
Q4 : Le service après-vente est-il garanti ?
A4 : Nous fournissons le service après-vente technique en ligne
professionnel. Si le produit échoue pendant l'expérience, nous
pouvons fournir
conseils linéaires par le téléphone, la vidéo et d'autres formes.
Q5 : Quelle est votre quantité d'ordre minimum ?
A5 : 1Kit.
Q6 : Quelle est la méthode de expédition ?
A6 : Il peut être embarqué par exprès (FEDEX, UPS, DHL, SME, etc.)
ou par l'air et la terre. Confirmez svp avec nous avant de passer
une commande.