RNase diagnostique in vitro de produits de mg N9046 100 une poudre

RNase une poudre

Catégorie de BR, pour l'usage de recherches seulement

Chat. No. N9046

Taille : mg 100

Activité spécifique : Protéine de ≥3000 U/mg (protéine de ≥60 Kunitz units/mg).

Forme : Contient la RNase A, poudre lyophilisée de mg 100

Description
La RNase A est une ribonucléase qui dégrade spécifiquement l'ARN monocatenaire aux résidus de C et d'U. Elle fend le lien de phosphodiester entre le 5' - ribose d'un nucléotide et du groupe de phosphate attachés au 3' - ribose d'un nucléotide adjacent de pyrimidine. Le 2' en résultant, 3' - le phosphate cyclique est hydrolysé au 3' correspondant - phosphate de nucléoside.

Applications

--Plasmide et préparation genomic d'ADN
--Retrait de l'ARN des préparations de recombinaison de protéine.
--Analyses de protection de ribonucléase
--Cartographie des mutations de simple-base en ADN ou ARN

Stockage

-20ºC a recommandé. La durée de conservation de la RNase une poudre est d'un an une fois stockée scellé et sec. La poudre de la RNase A est embarquée la température ambiante.

Contrôle de qualité

Fonctionellement déterminé la digestion d'ARN d'une procédure de purification d'ADN de plasmide.

Poids moléculaire
monomère 13,7 de kDa.

Définition d'unité d'activité
Une unité des causes d'enzymes une augmentation de l'absorbance de 1,0 260 nanomètre quand l'ARN de levure est hydrolysé 37°C et pH 5,0.
Cinquante unités sont approximativement équivalentes 1 unité de Kunitz.

Inhibition et inactivation
--Inhibiteurs : l'inhibiteur le plus efficace est une protéine du kDa ~50 du cytosol des cellules mammifères, par exemple, inhibiteur de RNase de RiboLock™.
--D'autres inhibiteurs : uridine 2', 3' - vanadate cyclique, 5' - diphosphoadenosine 3' - phophate et 5' - diphosphoadenosine 2' - phophate (2), SDS, pyrocarbonate diéthylique, thyocyanate de guanidinium de 4M plus le mercaptoéthanol 2 de 0.1M et ions de métaux lourds. Inactivé par l'extraction de phénol/chloroforme.
--Inactivé par l'extraction de phénol/chloroforme.

--Inactivé par la chauffage 95°C pendant 10 minutes.

Note

--La concentration fonctionnante pour la RNase A est 1-100 µg/ml selon l'application.
--L'enzyme est en activité dans un large éventail de conditions de réaction. Au millimètre faible teneur en sel de NaCl des concentrations (0 100), la RNase A fend l'ARN monocatenaire et bicaténaire aussi bien le brin d'ARN dans des hybrides de RNA-DNA. Cependant, aux concentrations en NaCl de 0,3 M ou plus haut, la RNase A fend spécifiquement l'ARN monocatenaire

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