Détails du produit
Protocole d'essai ELISA
Étiqueter les bandes individuelles qui seront utilisées et les
réactifs aliquotés comme suit:
Composant | Volume par réaction | 24 Réactions |
Anticorps la kanamycine n° 1 | 50 uL | 1.2 ml |
HRP-conjugué Ab #2 | 50 uL | 1.2 ml |
1X Solution de lavage | 10,0 mL | 24 ml |
Arrêtez le tampon | 100 L | 2.4 ml |
Substrate TMB | 100 L | 2.4 ml |
- Ajouter 50 I.U. de chaque norme de kanamycine en double dans
différents puits (ajouter des normes la plaque uniquement dans
l'ordre de faible concentration haute concentration).
- Ajouter 50 litres de chaque échantillon en double dans des puits
d'échantillonnage différents.
- Ajoutez 50 I.U. d'Abside HRP-conjugué 2 chaque puits et 50 I.U.
d'Anticorps de Kanamycine 1 chaque puits. Mélangez bien en agitant
doucement la plaque manuellement pendant 30 secondes.
- Incuber la plaque pendant 30 minutes température ambiante (20 ¢
25°C / 68 ¢ 77°F). (Évitez la lumière directe du soleil et les bancs froids pendant
l'incubation.) et
- Lavez la plaque 4 fois avec 250 I.L. de solution de lavage 1X.
Après le dernier lavage, inverser la plaque et secouer doucement la
plaque sur des serviettes en papier (Faites l'étape suivante
immédiatement après le lavage des plaques.Ne laissez pas la plaque
sécher l'air libre entre les étapes de travail).
- Ajoutez 100 I.L. de substrat TMB. Tempérez la réaction
immédiatement après l'ajout du substrat. Mélangez la solution en
secouant doucement la plaque manuellement pendant 30 s pendant
l'incubationNe remettez aucun substrat dans le récipient d'origine afin
d'éviter toute contamination potentielle. Toute solution de
substrat présentant une coloration indique une détérioration et
doit être jetée.Il est recommandé de couvrir la plaque de
microtiter pendant l'incubation.) et
- Après incubation pendant 15 minutes température ambiante (20 ¢ 25- Je ne sais pas.C / 68 ¢ 77- Je ne sais pas.F), ajouter 100 I.U. de tampon stop pour arrêter la réaction
enzymatique.
- Lire la plaque dès que possible après l'ajout du tampon d'arrêt sur
un lecteur de plaque longueur d'onde de 450 nm (avant la
lecture,utiliser une lingette sans peluche sur le fond de la plaque
pour s'assurer que l'humidité ou les empreintes digitales
n'interfèrent pas avec les relevés).