Kit d'essai d'acide nucléique d'écouvillon nasal et de gorge avec la certification ISO13485 de la CE FDA

Kit de détection des acides nucléiques du nouveau coronavirus (COVID-19)

(Méthode RT-PCR en temps réel)

[Spécification de l'emballage]

50 tests/kit

200 tests/kit

[Utilisation prévue]

Ce kit est utilisé pour la détection de l'acide nucléique COVID-19 (gène ORF1ab/N) et

diagnostic assisté et surveillance épidémiologique du COVID-19.

[Principe d'essai]

Les solutions de diagnostic Sansure COVID-19 sont utilisées pour détecter directement la présence d'ARN viral, qui sera détectable chez les patients avant que les anticorps ne se forment ou que les symptômes de la maladie ne soient présents, ce qui signifie que les résultats du test peuvent indiquer si quelqu'un attrape le virus très tôt ou non. dans leur maladie.

Le kit adopte le principe de la technologie PCR quantitative fluorescente en temps réel,

conçoit des amorces et des sondes spécifiques pour le COVID-19 (gène ORF1ab/N),

et les combine avec des instruments de PCR quantitatifs fluorescents en temps réel pour

détecter l'acide nucléique du virus COVID-19.Afin de réaliser la détection qualitative

de l'acide nucléique du virus COVID-19.

De plus, le système de détection PCR utilise un contrôle interne positif,

qui surveille la présence d'inhibiteurs de PCR dans les échantillons de test en détectant

si le signal de contrôle interne est normal, pour éviter un faux résultat négatif.

[Composants du kit de diagnostic]

Noter:

1. Ne pas mélanger ou échanger des composants de différents lots de kits.

2. Le contrôle négatif COVID-19 est une eau stérile sans nucléase et le contrôle COVID-19

Le contrôle positif est un ARN transcrit in vitro qui contient les gènes cibles ORF1ab,

Gène N et gène de contrôle interne.

[Stockage et stabilité]

1. Le kit de diagnostic doit être stocké dans une pochette scellée -20 ± 5 ℃. La date de péremption

est de 12 mois.

2. Veuillez vous référer la date de fabrication et la date de péremption sur l'emballage extérieur.

3. Le réactif reste valide et stable jusqu' la date de péremption s'il n'est pas utilisé.La trousse devrait

ne pas être congelé plus de 5 fois.

[Instrument applicable]

Le kit de diagnostic est applicable MA-6000, série ABI, série Bio-Rad, Roche

LightCycler R480, Cepheid SmartCycler, série Rotor-Gene et autres multicanaux

instruments de PCR quantitative en temps réel.

[Exigences relatives aux spécimens]

1. Types d'échantillons : Échantillons des voies respiratoires supérieures (y compris les écouvillons de gorge,

écouvillons nasaux, extraits nasopharyngés, crachats de toux profonde), voies respiratoires inférieures

spécimens (y compris extraits des voies respiratoires, liquide de lavage bronchique lavage alvéolaire

liquide, spécimens de biopsie de tissu pulmonaire), culture tissulaire et autres échantillons.

2. Conditions de stockage : Les spécimens collectés doivent être soumis pour inspection

en temps opportun, et les spécimens doivent être stockés 4℃ dans les 24 heures.

Il est préférable de stocker -70℃ pendant plus de 24 heures et d'éviter les gels-dégels répétés

cycles.

[Méthode d'essai]

1. Préparation du réactif (effectuée dans la "région de préparation du réactif")

1.1 Sortez chaque composant du kit de diagnostic et placez-les température ambiante.

Laisser les réactifs s'équilibrer température ambiante, puis vortexer chacun d'eux

respectivement pour une utilisation ultérieure.

1.2 Selon le nombre d'échantillons de test, le contrôle positif COVID-19 et

Contrôle négatif COVID-19, pipeter la quantité appropriée de mélange PCR COVID-19

et COVID-19 Enzyme Mix (COVID-19 PCR Mix 15 µl/test + COVID-19 Enzyme

Mix 5 µl /test) bien les mélanger pour faire un PCR-Master mix centrifuger

instantanément pour une utilisation ultérieure.

1.3 Transférer les réactifs préparés ci-dessus dans la "région de traitement des échantillons" pour

utilisation ultérieure.

2. Traitement et chargement des spécimens (effectués au "specimen

région de traitement")

2.1 Ce kit de diagnostic n'inclut pas le kit d'extraction d'ARN et d'ADN viral.Il est

recommandé d'utiliser le kit d'extraction d'ARN et d'ADN viral produit par Changsha Renji

Medical Equipment Co, Ltd. pour extraire l'ARN viral.L'opération spécifique est en

conformément ses instructions.

2.2 Ajouter 20 µl de PCR-Mastermix dans le tube de réaction PCR avec 5 µl d'échantillon traité ci-dessus,

Contrôle positif COVID-19 et Contrôle négatif COVID-19 et boucher le tube.Porter

sur la détection PCR quantitative de fluorescence sur l'instrument de PCR de fluorescence.

3. Amplification par PCR (réalisée dans la "zone d'amplification des acides nucléiques")

3.1 Placer les tubes de réaction PCR dans les puits d'échantillon de l'équipement d'amplification

Configuration du contrôle positif COVID-19 Contrôle négatif COVID-19 et des échantillons

testé dans la séquence correspondante et le nom de l'échantillon d'entrée.

3.2 Réglez les paramètres du cycle selon le tableau suivant pour l'amplification par PCR.

Noter:

1) La collection de fluorescence est fixée "Step3:55°C, the 30s".Sélection de la détection

canaux : FAM, HEX et Cy5, où le canal FAM est le gène ORF1ab et HEX

le canal est le gène N.Le canal Cy5 est le gène de contrôle interne et le système de réaction

s réglé sur 25 µl.

2) Les instruments PCR fluorescents de la série ABI ne sélectionnent pas l'étalonnage ROX et sélectionnent

Aucun pour le groupe de trempe.

[Valeur de jugement positif et intervalle de référence]

1. Paramétrage des conditions pour l'analyse des résultats

Le principe d'ajustement de la ligne de base et du seuil est généralement basé sur les résultats

de l'analyse automatique de l'instrument.Lorsque la pente globale de la courbe

apparaît, les valeurs de début, de fin et de seuil de la ligne de base peuvent être ajustées

selon l'image.Habituellement, l'utilisateur peut l'ajuster en fonction de la réalité

situation.La valeur Début peut être réglée sur 3-15 et la valeur Fin peut être réglée sur 5-20.

Ajustez la courbe d'amplification du contrôle négatif pour qu'elle soit droite ou inférieure

la ligne de maintien du seuil.

2. La validité du kit

2.1Le contrôle positif COVID-19:Les canaux FAM, HEX et Cy 5 ont des

Courbes d'amplification de type S et Cts≤32.

2.2Le contrôle négatif COVID-19:Les canaux FAM, HEX et Cy 5 n'ont pas

Ct ou Ct>38.

2.3Noter:Les conditions ci-dessus doivent être remplies en même temps, sinon cela

l'expérience n'est pas valide et doit être répétée.

3. La valeur du jugement positif

Grce l'étude des valeurs de référence, il a été déterminé que la valeur de référence Ct

du gène cible et du gène de contrôle interne détectés par ce kit étaient tous les deux de 38.

[L'exemple de jugement de résultat]

1. Si l'échantillon de test détecte une courbe d'amplification de type S atypique dans le FAM, HEX

et Cy 5 canaux et le Ct est ≤ 38, l'échantillon peut être considéré comme COVID-19

positif.

2. Si l'échantillon de test n'a pas de Ct ou Ct> 38 dans les canaux FAM et HEX, et qu'il y a

est une courbe d'amplification de type S atypique dans le canal de contrôle interne (Cy 5), Cts≤38,

l'échantillon peut être jugé comme étant COVID-19 négatif.

3. Si l'échantillon de test n'a qu'une valeur Ct de 38 dans un seul canal du FAM ou HEX

canal, et il y a une courbe d'amplification de type S atypique dans le contrôle interne

channel(Cy 5) , Ct≤38, les résultats doivent être retestés.Si les résultats répétés sont

cohérent, l'échantillon peut être jugé comme COVID-19 positif, les résultats répétés

sont négatifs l'exception de la courbe d'amplification typique de type S du contrôle interne

channel(Cy 5) , Ct≤38, qui pourrait être jugé comme COVID-19 négatif.

4. Si aucune courbe d'amplification typique de type S (aucune valeur Ct) ou valeur Ct> 38 n'est détectée dans

les canaux FAM, HEX et Cy 5 de l'échantillon de test, cela signifie qu'il y a un

problème avec la qualité de l'échantillon ou un problème avec l'opération.Si le résultat

n'est pas valide, vous devez rechercher et éliminer la cause, prélever nouveau l'échantillon,

et répétez le test (si le résultat du test est toujours invalide, veuillez contacter l'entreprise).

[Limites de la méthode de détection]

1. Les résultats des tests du kit de diagnostic ne peuvent être utilisés qu' titre de référence clinique.La clinique

le diagnostic et le traitement des patients doivent être considérés en conjonction avec leur

symptômes, signes, antécédents médicaux et autres affections connexes.

2. De faux résultats négatifs peuvent se produire lorsque la concentration de la substance nucléique détectée

l'acide dans l'échantillon de test est inférieur la limite de détection minimale de ce kit.

3. Mauvaise manipulation de l'échantillon testé pendant la collecte, le transport,

le stockage et le traitement peuvent facilement entraîner une dégradation de l'ARN et des faux négatifs

résultats.

4.Lorsque les échantillons sont contaminés lors de la collecte, du transport, du stockage,

et le traitement, il est facile d'obtenir des résultats faussement positifs.

[Indice de performance du produit]

1.LOD : La limite de détection est de 200 copies/ml.

2. Précision : coefficient de variation (CV %] de la valeur Ct de précision dans le lot ≤ 3 %.

3. Spécificité : il n'y a pas de réaction croisée entre le kit et les échantillons positifs, tels que

comme le coronavirus humain HCoV-NL63, le coronavirus humain HCoV-OC43, le SRAS

Coronavirus, Coronavirus MERS, Virus de la grippe A, Virus de la grippe B Yamagata,

Victoria, virus de la grippe H1N1, virus de la grippe H3N2, virus de la grippe H5N1,

Virus de la grippe H7N9, virus respiratoire syncytial A, adénovirus (type 2) ,

Adénovirus (type 2), Mycoplasma Pneumoniae, Chlamydia Pneumoniae,

Coqueluche, Streptococcus Pneumoniae, Rhinovirus (Type A) etc.

[Précautions]

1. L'ensemble du processus de détection doit être effectué en stricte conformité avec les

exigences de ce manuel dans la zone de préparation des réactifs, la zone de traitement des échantillons,

et zone d'amplification PCR, et les vêtements expérimentaux, instruments,

et les consommables de chaque zone doivent être utilisés indépendamment et ne peuvent pas être mélangés.

2. Pour éviter la dégradation de l'ARN, le processus de traitement des échantillons doit être utilisé

0-4℃, et le test doit être effectué immédiatement après l'expérience

complété.Les consommables ustensiles utilisés dans le traitement des échantillons doivent être exempts de nucléase.

3. Des contrôles négatifs et positifs doivent être définis pour chaque expérience.

4.Tous les réactifs du kit doivent être entièrement décongelés et mélangés température ambiante et

centrifugé immédiatement avant utilisation.

5.Tous les contrôles négatifs et positifs du kit doivent être transférés dans l'échantillon

zone de préparation et stocké séparément avant la première utilisation.

6. Pour éviter les interférences de fluorescence, évitez de toucher le tube de réaction PCR

directement mains nues, et éviter tout marquage sur le tube de réaction PCR.

7. Les paramètres liés l'amplification de l'instrument doivent être définis conformément

les exigences pertinentes de ce manuel et les différents lots de réactifs ne peuvent pas

être mélangé.

8.Les déchets de produit pendant l'expérience doivent être détoxifiés avant d'être

mis au rebut.

[INDEX DES SYMBOLES]

[EXPORTATEUR]

Magnus International Limited

F12, New City International Mansion A, 234 Huapao Ave.

Liuyang, Province du Hunan 410300 Chine

Contact:Goodwellmedical@gmail.com

[FABRICANT]

Changsha Renji Medical Equipment Co., Ltd.

No.18 Xiangtai Road, district de Liuyang Jingkai,

Changsha City, Hunan Province 410300 Chine

[VUE D'USINE]

[ATELIER D'USINE]

[PRODUIT ET NORMES]

[ATTESTATIONS]

[FAQ]