Puits humains du kit 96 de l'insuline ELISA de spécificité et de précision
Cat.No E0010Hu
Chaîne standard de courbe : 0.2mIU/L - 60mIU/L
Sensibilité : 0.11mIU/L
Taille : 96 puits
Stockage : Stockez les réactifs à 2-8°C. pour le stockage de six mois fini se rapportent à la date d'échéance le gardent aux cycles de dégel répétés Avoid de -20°C. Si différents réactifs sont ouverts on lui recommande que le kit soit employé dans un délai de 1 mois.
* ce produit sert pour l'usage de recherches seulement, pas des procédures de diagnostic. Il est recommandent fortement de lire cette instruction entièrement avant emploi.
Principe d'analyse
Ce kit est une analyse Enzyme-liée d'immunosorbant (ELISA). Le plat a été enduit d'un préenduisage avec de l'anticorps humain d'Institut central des statistiques. L'Institut central des statistiques présentent dans l'échantillon est ajouté et lie aux anticorps enduits sur les puits. Et l'anticorps humain alors biotinylated d'Institut central des statistiques est ajouté et lie à l'Institut central des statistiques dans l'échantillon. Alors Streptavidin-HRP est ajouté et lie à l'anticorps d'Institut central des statistiques de Biotinylated. Après incubation Streptavidin-HRP défait est enlevé pendant une étape de lavage. La solution de substrat est alors ajoutée et la couleur se développe proportionnellement à la quantité d'Institut central des statistiques humain. La réaction est terminée par l'addition d'acide arrêtent la solution et l'absorbance est mesurée à 450 nanomètre.
Réactif fourni
| Composants |
Quantité |
| Solution étalon (80mIU/L) |
0.5ml x1 |
| Plat enduit d'un préenduisage d'ELISA |
12 * 8 bandes bonnes x1 |
| Diluant standard |
3ml x1 |
| Streptavidin-HRP |
6ml x1 |
| Arrêtez la solution |
6ml x1 |
| Solution A de substrat |
6ml x1 |
| Solution B de substrat |
6ml x1 |
| Concentré de tampon de lavage (30x) |
20ml x1 |
| Anticorps humain d'Institut central des statistiques de Biotinylated |
1ml x1 |
| Instruction d'utilisateur |
1 |
| Scelleur de plat |
PICS 2 |
| Sac de tirette |
1 PIC |
Matériel requis mais non assuré
- Incubateur 37°C±0.5°C
- Papier absorbant
- Pipettes de précision et astuces jetables de pipette
- Nettoyez les tubes
- Désionisé ou eau distillée
- Lecteur de Microplate avec 450 le filtre de longueur d'onde du ± 10nm
Précautions
- Avant l'utilisation, le kit et l'échantillon devraient être chauffés naturellement à la température ambiante 30 minutes.
- Cette instruction doit être strictement suivie dans l'expérience.
- Une fois que le nombre désiré de bandes a été enlevé, rescellez immédiatement le sac pour protéger le rester contre la détérioration. Couvrez tous les réactifs si non utilisable.
- Make sure introduisant à la pipette l'ordre et le taux d'addition de bien-à-bien en introduisant à la pipette des réactifs.
- Les astuces de pipette et le scelleur de plat à disposition devraient être propres et jetables pour éviter la contamination transversale.
- Évitez d'employer les réactifs de différents groupes ensemble.
- La solution B de substrat est sensible à la lumière, n'exposent pas la solution B de substrat pour s'allumer pendant longtemps.
- Arrêtez la solution contient l'acide. Veuillez porter l'oeil, la main et la protection de la peau en employant ce matériel. Évitez le contact de la peau ou des muqueuses avec du réactif de kit.
- Le kit ne devrait pas être employé au delà de la date d'échéance.
Préparation de réactif
La norme reconstituent le 120μl de la norme (80mIU/L) avec 120μl du diluant standard pour produire d'une solution d'action standard 40mIU/L. Permettez à la norme de se reposer pendant 15 minutes avec l'agitation douce avant de faire des dilutions. Préparez les points standard en double en diluant en série la solution d'action standard (40mIU/L) 1:2 avec le diluant standard pour produire solutions 20mIU/L, 10mIU/L, 5mIU/L et 2.5mIU/L. Le diluant standard sert de norme zéro (0 mIU/L). Toute solution restante devrait être gelée à -20°C et être employée dans un délai d'un mois. La dilution des solutions étalons suggérées sont comme suit :
| 40mIU/L |
No.5 standard |
diluant original de la norme 120μl + de la norme 120μl |
| 20mIU/L |
No.4 standard |
120μl standard diluant de la norme No.5 + 120μl |
| 10mIU/L |
No.3 standard |
120μl standard diluant de la norme No.4 + 120μl |
| 5mIU/L |
No.2 standard |
120μl standard diluant de la norme No.3 + 120μl |
| 2.5mIU/L |
No.1 standard |
120μl standard diluant de la norme No.2 + 120μl |
| Concentration standard |
No.5 standard |
No.4 standard |
No.3 standard |
No.2 standard |
No.1 standard |
| 80mIU/L |
40mIU/L |
20mIU/L |
10mIU/L |
5mIU/L |
2.5mIU/L |
Tampon 20ml dilué de lavage du concentré 30x de tampon de lavage dans désionisé ou eau distillée pour rapporter 500 ml de tampon du lavage 1x. Si les cristaux ont formé dans le concentré, mélange doucement jusqu'à ce que les cristaux se soient complètement dissous.
Calcul de résultat
Construisez une courbe standard en traçant l'OD moyen pour chacun standard sur (y) l'axe vertical contre la concentration sur (x) l'axe horizontal et dessinez une courbe de l'ajustement normal par les points sur le graphique. Ces calculs peuvent mieux être exécutés avec le logiciel sur ordinateur de courbe-montage et la ligne de l'ajustement normal peut être déterminée par analyse de régression.
Références
Edghill E.L., Flanagan S.E., la correction heure du matin, Boustred C., Parrish A., protège B., le berger M.H., Hussain K., Kapoor R.R., Malecki M., MacDonald M.J., Stoy J., Steiner D.F., gauche de Philipson, Bell G.I., Hattersley A.T., Ellard S.
Diabète 57:1034- 1042(2008)
