96 de puits haut bêta-defensin 4 ELISA de souris kit de Sensitivie
Cat.No E1204Mo
Stockage : Stockez les réactifs à 2-8°C. pour le stockage de six mois fini se rapportent à la date d'échéance le gardent aux cycles de dégel répétés Avoid de -20°C. Si différents réactifs sont ouverts on lui recommande que le kit soit employé dans un délai de 1 mois.
* ce produit sert pour l'usage de recherches seulement, pas des procédures de diagnostic. Il est recommandent fortement de lire cette instruction entièrement avant emploi.
Principe d'analyse
Ce kit est une analyse Enzyme-liée d'immunosorbant (ELISA). Le plat a été enduit d'un préenduisage avec de l'anticorps de la souris DEFB4. DEFB4 présentent dans l'échantillon sont ajoutés et lient aux anticorps enduits sur les puits. Et l'anticorps alors biotinylated de la souris DEFB4 est ajouté et lie à DEFB4 dans l'échantillon. Alors Streptavidin-HRP est ajouté et lie à l'anticorps de Biotinylated DEFB4. Après incubation Streptavidin-HRP défait est enlevé pendant une étape de lavage. La solution de substrat est alors ajoutée et la couleur se développe proportionnellement à la quantité de la souris DEFB4. La réaction est terminée par l'addition d'acide arrêtent la solution et l'absorbance est mesurée à 450 nanomètre.
Réactif fourni
| Composants |
Quantité |
| Solution étalon (12.8ng/ml) |
0.5ml x1 |
| Plat enduit d'un préenduisage d'ELISA |
12 * 8 bandes bonnes x1 |
| Diluant standard |
3ml x1 |
| Streptavidin-HRP |
6ml x1 |
| Arrêtez la solution |
6ml x1 |
| Solution A de substrat |
6ml x1 |
| Solution B de substrat |
6ml x1 |
| Concentré de tampon de lavage (30x) |
20ml x1 |
| Anticorps de la souris DEFB4 de Biotinylated |
1ml x1 |
| Instruction d'utilisateur |
1 |
| Scelleur de plat |
PICS 2 |
| Sac de tirette |
1 PIC |
Préparation de réactif
Tous les réactifs devraient être apportés à la température ambiante avant emploi.
La norme reconstituent le 120μl de la norme (12.8ng/ml) avec 120μl de diluant standard pour produire d'une solution de l'action standard 6.4ng/ml. Permettez à la norme de se reposer pendant 15 minutes avec l'agitation douce avant de faire des dilutions. Préparez les points standard en double en diluant en série le 1:2 de la solution d'action standard (6.4ng/ml) avec le diluant standard pour produire les solutions 3.2ng/ml, 1.6ng/ml, 0.8ng/ml et 0.4ng/ml. Le diluant standard sert de norme zéro (0 ng/ml). Toute solution restante devrait être gelée à -20°C et être employée dans un délai d'un mois. La dilution des solutions étalons suggérées sont comme suit :
| 6.4ng/ml |
No.5 standard |
diluant original de la norme 120μl + de la norme 120μl |
| 3.2ng/ml |
No.4 standard |
120μl standard diluant de la norme No.5 + 120μl |
| 1.6ng/ml |
No.3 standard |
120μl standard diluant de la norme No.4 + 120μl |
| 0.8ng/ml |
No.2 standard |
120μl standard diluant de la norme No.3 + 120μl |
| 0.4ng/ml |
No.1 standard |
120μl standard diluant de la norme No.2 + 120μl |
| Concentration standard |
No.5 standard |
No.4 standard |
No.3 standard |
No.2 standard |
No.1 standard |
| 12.8ng/ml |
6.4ng/ml |
3.2ng/ml |
1.6ng/ml |
0.8ng/ml |
0.4ng/ml |
Tampon 20ml dilué de lavage du concentré 30x de tampon de lavage dans désionisé ou eau distillée pour rapporter 500 ml de tampon du lavage 1x. Si les cristaux ont formé dans le concentré, mélange doucement jusqu'à ce que les cristaux se soient complètement dissous.
Résumé
- Préparez tous les réactifs, échantillons et normes.
- Ajoutez le réactif suffisant et d'ELISA dans chacun bien. Incubez pour 1 heure à 37°C.
-
Lavez le plat 5 fois.
-
Ajoutez la solution A et B. Incubate de substrat pendant 10 minutes à 37°C.
-
Ajoutez arrêtent la solution et la couleur se développe.
-
Lisez la valeur d'OD d'ici 10 minutes.
Références
Morrison G.M., Semple C.A.M., Kilanowski F.M., colline R.E., Dorin J.R.
Mole. Biol. Evol. 20:460- 470(2003)
