Serrez le type facteurs de croissance comme une insuline bovins 1 kit d'ELISA avec la sensibilité forte 96 Wells
Cat.No E0016 BO
Chaîne standard de courbe : 1ng/ml - 400ng/ml
Sensibilité : 0.53ng/ml
Taille : 96 puits
Collection de spécimen
Le sérum permettent au sérum de coaguler pendant 10-20 minutes à la température ambiante. Centrifugeuse à 2000-3000 t/mn pendant 20 minutes.
Le plasma rassemblent le plasma utilisant l'EDTA ou l'héparine comme anticoagulant. Centrifugez les échantillons pendant 15 minutes à 2000-3000 t/mn à 2 - 8°C d'ici 30 minutes de collection.
L'urine se rassemblent par le tube stérile. Centrifugeuse à 2000-3000 t/mn pendant approximativement 20 minutes. En rassemblant le fluide liquide et céphalo-rachidien pleuroperitoneal, suivez svp les procédures mentionnées ci-dessus.
Le surnageant de culture cellulaire se rassemblent par les tubes stériles en examinant sécrétez les composants. Centrifugez à 2000-3000 t/mn pendant approximativement 20 minutes. Rassemblez les supernatants soigneusement. En examinant les composants dans la cellule, employez PBS (pH 7.2-7.4) pour diluer la suspension de cellules à la concentration en cellules d'approximativement 1 million/ml. Endommagez les cellules pendant les cycles gel-dégel répétés pour laisser les composants intérieurs. Centrifugez à 2000-3000 t/mn pendant approximativement 20 minutes.
Le tissu d'autres liquides corporels rincent des tissus dans PBS (pH 7,4) pour enlever le sang excédentaire complètement et pour peser avant homogénéisation. Hachez les tissus et homogénéisez-les dans PBS (pH7.4) avec un homogénisateur en verre sur la glace. Dégelez à 2-8°C ou gelez à la centrifugeuse de -20°C. à 2000-3000 t/mn pendant approximativement 20 minutes.
le *Sample ne peut pas être dilué avec ce kit. En raison le du matériel nous employons pour préparer le kit, l'interférence de matrice témoin peut faussement diminuer la spécificité et l'exactitude de l'analyse.
le produit de *This sert pour l'usage de recherches seulement, pas des procédures de diagnostic. Il est recommandent fortement de lire cette instruction entièrement avant emploi.
Précision
La précision d'Intra-analyse (précision dans une analyse) trois échantillons de concentration connue ont été examinées d'un plat pour évaluer la précision d'intra-analyse.
La précision d'Inter-analyse (précision entre les analyses) trois échantillons de concentration connue ont été examinées dans des analyses distinctes pour évaluer la précision d'inter-analyse.
Cv (%) = SD/mean X 100
Intra-analyse : Cv<8>
Inter-analyse : Cv<10>
Utilisation prévue
Ce kit de sandwich est pour la détection quantitative précise des facteurs de croissance comme une insuline bovins 1 (également connus sous le nom d'IGF-1) en sérum, plasma, surnageants de culture cellulaire, lysates de cellules, homogénats de tissu.
Précautions
- Avant l'utilisation, le kit et l'échantillon d'essai d'ELISA devraient être chauffés naturellement à la température ambiante 30 minutes.
- Cette instruction doit être strictement suivie dans l'expérience.
- Une fois que le nombre désiré de bandes a été enlevé, rescellez immédiatement le sac pour protéger le rester contre la détérioration. Couvrez tous les réactifs si non utilisable.
- Make sure introduisant à la pipette l'ordre et le taux d'addition de bien-à-bien en introduisant à la pipette des réactifs.
- Les astuces de pipette et le scelleur de plat à disposition devraient être propres et jetables pour éviter la contamination transversale.
- Évitez d'employer les réactifs de différents groupes ensemble.
- La solution B de substrat est sensible à la lumière, n'exposent pas la solution B de substrat pour s'allumer pendant longtemps.
- Arrêtez la solution contient l'acide. Veuillez porter l'oeil, la main et la protection de la peau en employant ce matériel. Évitez le contact de la peau ou des muqueuses avec du réactif de kit.
- Le kit d'essai d'ELISA ne devrait pas être employé au delà de la date d'échéance.
Préparation de réactif
Tous les réactifs devraient être apportés à la température ambiante avant emploi.
La norme reconstituent le 120μl de la norme (480ng/ml) avec 120μl de diluant standard pour produire d'une solution de l'action standard 240ng/ml. Permettez à la norme de se reposer pendant 15 minutes avec l'agitation douce avant de faire des dilutions. Préparez les points standard en double en diluant en série le 1:2 de la solution d'action standard (240ng/ml) avec le diluant standard pour produire les solutions 120ng/ml, 60ng/ml, 30ng/ml et 15ng/ml. Le diluant standard sert de norme zéro (0 ng/ml). Toute solution restante devrait être gelée à -20°C et être employée dans un délai d'un mois. La dilution des solutions étalons suggérées sont comme suit :
| 240ng/ml |
No.5 standard |
diluant original de la norme 120μl + de la norme 120μl |
| 120ng/ml |
No.4 standard |
120μl standard diluant de la norme No.5 + 120μl |
| 60ng/ml |
No.3 standard |
120μl standard diluant de la norme No.4 + 120μl |
| 30ng/ml |
No.2 standard |
120μl standard diluant de la norme No.3 + 120μl |
| 15ng/ml |
No.1 standard |
120μl standard diluant de la norme No.2 + 120μl |
| Concentration standard |
No.5 standard |
No.4 standard |
No.3 standard |
No.2 standard |
No.1 standard |
| 480ng/ml |
240ng/ml |
120ng/ml |
60ng/ml |
30ng/ml |
15ng/ml |
Tampon 20ml dilué de lavage du concentré 30x de tampon de lavage dans désionisé ou eau distillée pour rapporter 600 ml de tampon du lavage 1x. Si les cristaux ont formé dans le concentré, mélange doucement jusqu'à ce que les cristaux se soient complètement dissous.
Résumé
1. Préparez tous les réactifs, échantillons et normes.
2. Ajoutez l'échantillon et le réactif d'ELISA dans chacun bien. Incubez pour 1 heure à 37°C.
3. Lavez le plat 5 fois.
4. Ajoutez la solution A et B. Incubate de substrat pendant 10 minutes à 37°C.
5. Ajoutez arrêtent la solution et la couleur se développe.
6. Lisez la valeur d'OD d'ici 10 minutes.
