96 Wells ont adapté Corticotropin aux besoins du client humain libérant l'hormone CRH ELISA Kit
Cat.No EHU1000
Chaîne standard de courbe : 1ng/ml - 40ng/ml
Sensibilité : 0.53ng/ml
Taille : 96 puits
Stockage : Stockez les réactifs à 2-8°C. Pour le stockage plus de six mois référez-vous à la date d'échéance pour le garder à -20°C. Avoid a répété des cycles de dégel. Si différents réactifs sont ouverts on lui recommande que le kit soit employé dans un délai de 1 mois.
Principe d'analyse
Ce kit est une analyse Enzyme-liée d'immunosorbant (ELISA). Le plat a été enduit d'un préenduisage avec de l'anticorps humain de CRH. Le présent de CRH dans l'échantillon est ajouté et des grippages aux anticorps est enduits sur les puits. Et l'anticorps humain alors biotinylated de CRH est ajouté et des grippages à CRH dans l'échantillon. Alors Streptavidin-HRP est ajouté et lie à l'anticorps de Biotinylated CRH. Après Streptavidin-HRP défait par incubation est enlevé pendant une étape de lavage. La solution de substrat est alors ajoutée et la couleur se développe proportionnellement à la quantité de CRH humain. La réaction est terminée par l'addition d'acide arrêtent la solution et l'absorbance est mesurée à 450 nanomètre.
Réactif fourni
| Composants |
Quantité |
| Solution étalon (40ng/ml) |
0.5ml x1 |
| ELISA Plate enduite d'un préenduisage |
12 * 8 bandes bonnes x1 |
| Diluant standard |
3ml x1 |
| Streptavidin-HRP |
6ml x1 |
| Arrêtez la solution |
6ml x1 |
| Solution A de substrat |
6ml x1 |
| Solution B de substrat |
6ml x1 |
| Concentré de tampon de lavage (30x) |
20ml x1 |
| Anticorps humain de Biotinylated CRH |
1ml x1 |
| Instruction d'utilisateur |
1 |
| Scelleur de plat |
PICS 2 |
| Sac de tirette |
1 image |
Préparation de réactif
Tous les réactifs devraient être apportés à la température ambiante avant emploi. La norme reconstituent le 120μl de la norme (40ng/ml) avec 120μl de diluant standard pour produire d'une solution de l'action standard 20ng/ml. Permettez à la norme de se reposer pendant 15 minutes avec l'agitation douce avant de faire des dilutions. Préparez les points standard en double en diluant en série le 1:2 de la solution d'action standard (20ng/ml) avec le diluant standard pour produire les solutions 10ng/ml, 5ng/ml, 2.5ng/ml et 1.25ng/ml. Servir standard de diluant de zéro normes (0 ng/ml). Toute solution restante devrait être gelée à -20℃ et être employée dans un délai d'un mois. La dilution des solutions étalons suggérées sont comme suit :
| 20ng/ml |
No.5 standard |
norme 120μl originale + diluant 120μl standard |
| 10ng/ml |
No.4 standard |
120μl standard diluant No.5 + 120μl standard |
| 5ng/ml |
No.3 standard |
120μl standard diluant No.4 + 120μl standard |
| 2.5ng/ml |
No.2 standard |
120μl standard diluant No.3 + 120μl standard |
| 1.25ng/ml |
No.1 standard |
120μl standard diluant No.2 + 120μl standard |
| Concentration standard |
No.5 standard |
No.4 standard |
No.3 standard |
No.2 standard |
No.1 standard |
| 40ng/ml |
20ng/ml |
10ng/ml |
5ng/ml |
2.5ng/ml |
1.25ng/ml |
Tampon 20ml dilué de lavage du concentré 30x de tampon de lavage dans désionisé ou eau distillée pour rapporter 500 ml de tampon du lavage 1x. Si les cristaux ont formé dans le concentré, mélange doucement jusqu'à ce que les cristaux se soient complètement dissous.
Résumé
1. Préparez tous les réactifs, échantillons et normes.
2. Ajoutez l'échantillon et le réactif d'ELISA dans chaque puits. Incubez pour 1 heure à 37°C.
3. Lavez le plat 5 fois.
4. Ajoutez la solution A et B. Incubate de substrat pendant 10 minutes à 37°C.
5. Ajoutez arrêtent la solution et la couleur se développe.
6. Lisez la valeur d'OD d'ici 10 minutes.
Calcul de résultat
Construisez une courbe standard en traçant l'OD moyen pour chaque norme sur (y) l'axe vertical contre la concentration sur (x) l'axe horizontal et dessinez une courbe de l'ajustement normal par les points sur le graphique. Ces calculs peuvent mieux être exécutés avec le logiciel sur ordinateur de courbe-montage et la ligne de l'ajustement normal peut être déterminée par analyse de régression.
