ET 1 kit sensible de la souris ELISA de kit d'analyse d'immunosorbant de sandwich haut 2 heures de longueur d'analyse
Cat.No E0257Mo
Chaîne standard de courbe : 1ng/L - 400ng/L
Sensibilité : 0.43ng/L
Taille : 96 puits
Stockage : Stockez les réactifs à 2-8°C. pour le stockage de six mois fini se rapportent à la date d'échéance le gardent aux cycles de dégel répétés Avoid de -20°C. Si différents réactifs sont ouverts on lui recommande que le kit soit employé dans un délai de 1 mois.
le produit de *This sert pour l'usage de recherches seulement, pas des procédures de diagnostic. Il est recommandent fortement de lire cette instruction entièrement avant emploi.
Utilisation prévue
Ce kit de sandwich est pour la détection quantitative précise de l'Endothelin 1 de souris (également connu sous le nom d'ET-1) en sérum, plasma, surnageants de culture cellulaire, lysates de cellules, homogénats de tissu.
Principe d'analyse
Ce kit est une analyse Enzyme-liée d'immunosorbant (ELISA). Le plat a été enduit d'un préenduisage avec de l'anticorps de la souris ET-1. ET-1 présentent dans l'échantillon sont ajoutés et lient aux anticorps enduits sur les puits. Et l'anticorps alors biotinylated de la souris ET-1 est ajouté et lie à ET-1 dans l'échantillon. Alors Streptavidin-HRP est ajouté et lie à l'anticorps de Biotinylated ET-1. Après incubation Streptavidin-HRP défait est enlevé pendant une étape de lavage. La solution de substrat est alors ajoutée et la couleur se développe proportionnellement à la quantité de la souris ET-1. La réaction est terminée par l'addition d'acide arrêtent la solution et l'absorbance est mesurée à 450 nanomètre.
Précautions
- Avant l'utilisation, le kit et l'échantillon devraient être chauffés naturellement à la température ambiante 30 minutes.
- Cette instruction doit être strictement suivie dans l'expérience.
- Une fois que le nombre désiré de bandes a été enlevé, rescellez immédiatement le sac pour protéger le rester contre la détérioration. Couvrez tous les réactifs si non utilisable.
- Make sure introduisant à la pipette l'ordre et le taux d'addition de bien-à-bien en introduisant à la pipette des réactifs.
- Les astuces de pipette et le scelleur de plat à disposition devraient être propres et jetables pour éviter la contamination transversale.
- Évitez d'employer les réactifs de différents groupes ensemble.
- La solution B de substrat est sensible à la lumière, n'exposent pas la solution B de substrat pour s'allumer pendant longtemps.
- Arrêtez la solution contient l'acide. Veuillez porter l'oeil, la main et la protection de la peau en employant ce matériel. Évitez le contact de la peau ou des muqueuses avec du réactif de kit.
- Le kit ne devrait pas être employé au delà de la date d'échéance.
Des réactifs de PreparationAll de réactif devraient être apportés à la température ambiante avant emploi. La norme reconstituent le 120μl de la norme (480ng/L) avec 120μl du diluant standard pour produire d'une solution d'action standard 240ng/L. Permettez à la norme de se reposer pendant 15 minutes avec l'agitation douce avant de faire des dilutions. Préparez les points standard en double en diluant en série la solution d'action standard (240ng/L) 1:2 avec le diluant standard pour produire solutions 120ng/L, 60ng/L, 30ng/L et 15ng/L. Le diluant standard sert de norme zéro (0 ng/L). Toute solution restante devrait être gelée à -20℃ et être employée dans un délai d'un mois. La dilution des solutions étalons suggérées sont comme suit :
| 240ng/L |
No.5 standard |
diluant original de la norme 120μl + de la norme 120μl |
| 120ng/L |
No.4 standard |
120μl standard diluant de la norme No.5 + 120μl |
| 60ng/L |
No.3 standard |
120μl standard diluant de la norme No.4 + 120μl |
| 30ng/L |
No.2 standard |
120μl standard diluant de la norme No.3 + 120μl |
| 15ng/L |
No.1 standard |
120μl standard diluant de la norme No.2 + 120μl |
| Concentration standard |
No.5 standard |
No.4 standard |
No.3 standard |
No.2 standard |
No.1 standard |
| 480ng/L |
240ng/L |
120ng/L |
60ng/L |
30ng/L |
15ng/L |
Tampon 20ml dilué de lavage du concentré 25x de tampon de lavage dans désionisé ou eau distillée pour rapporter 500 ml de tampon du lavage 1x. Si les cristaux ont formé dans le concentré, mélange doucement jusqu'à ce que les cristaux se soient complètement dissous.
Résumé
1. Préparez tous les réactifs, échantillons et normes.
2. Ajoutez l'échantillon et le réactif d'ELISA dans chacun bien. Incubez pour 1 heure à 37°C.
3. Lavez le plat 5 fois.
4. Ajoutez la solution A et B. Incubate de substrat pendant 10 minutes à 37°C.
5. Ajoutez arrêtent la solution et la couleur se développe.
6. Lisez la valeur d'OD d'ici 10 minutes.
Calcul de résultat
Construisez une courbe standard en traçant l'OD moyen pour chacun standard sur (y) l'axe vertical contre la concentration sur (x) l'axe horizontal et dessinez une courbe de l'ajustement normal par les points sur le graphique. Ces calculs peuvent mieux être exécutés avec le logiciel sur ordinateur de courbe-montage et la ligne de l'ajustement normal peut être déterminée par analyse de régression.
