Puits du kit 96 de Ghrelin ELISA de rat de spécificité et de sensibilité
Cat.No E0896Ra
Chaîne standard de courbe : 40ng/L - 12000ng/L
Sensibilité : 20.56ng/L
Taille : 96 puits
Stockage : Stockez les réactifs à 2-8°C. pour le stockage de six mois fini se rapportent à la date d'échéance le gardent aux cycles de dégel répétés Avoid de -20°C. Si différents réactifs sont ouverts on lui recommande que le kit soit employé dans un délai de 1 mois.
* ce produit sert pour l'usage de recherches seulement, pas des procédures de diagnostic. Il est recommandent fortement de lire cette instruction entièrement avant emploi.
Utilisation prévue
Ce kit de sandwich est pour la détection quantitative précise du rat Ghrelin (également connu sous le nom de GHRL) en sérum, plasma, surnageants de culture cellulaire, lysates de cellules, homogénats de tissu.
Principe d'analyse
Ce kit est une analyse Enzyme-liée d'immunosorbant (ELISA). Le plat a été enduit d'un préenduisage avec de l'anticorps du rat GHRL. GHRL présentent dans l'échantillon sont ajoutés et lient aux anticorps enduits sur les puits. Et l'anticorps alors biotinylated du rat GHRL est ajouté et lie à GHRL dans l'échantillon. Alors Streptavidin-HRP est ajouté et lie à l'anticorps de Biotinylated GHRL. Après incubation Streptavidin-HRP défait est enlevé pendant une étape de lavage. La solution de substrat est alors ajoutée et la couleur se développe proportionnellement à la quantité du rat GHRL. La réaction est terminée par l'addition d'acide arrêtent la solution et l'absorbance est mesurée à 450 nanomètre.
Réactif fourni
| Composants |
Quantité |
| Solution étalon (12800ng/L) |
0.5ml x1 |
| Plat enduit d'un préenduisage d'ELISA |
12 * 8 bandes bonnes x1 |
| Diluant standard |
3ml x1 |
| Streptavidin-HRP |
6ml x1 |
| Arrêtez la solution |
6ml x1 |
| Solution A de substrat |
6ml x1 |
| Solution B de substrat |
6ml x1 |
| Concentré de tampon de lavage (30x) |
20ml x1 |
| Anticorps du rat GHRL de Biotinylated |
1ml x1 |
| Instruction d'utilisateur |
1 |
| Scelleur de plat |
PICS 2 |
| Sac de tirette |
1 PIC |
Préparation de réactif
Tous les réactifs devraient être apportés à la température ambiante avant emploi.
La norme reconstituent le 120μl de la norme (12800ng/L) avec 120μl du diluant standard pour produire d'une solution d'action standard 6400ng/L. Permettez à la norme de se reposer pendant 15 minutes avec l'agitation douce avant de faire des dilutions. Préparez les points standard en double en diluant en série la solution d'action standard (6400ng/L) 1:2 avec le diluant standard pour produire solutions 3200ng/L, 1600ng/L, 800ng/L et 400ng/L. Le diluant standard sert de norme zéro (0 ng/L). Toute solution restante devrait être gelée à -20°C et être employée dans un délai d'un mois. La dilution des solutions étalons suggérées sont comme suit :
| 6400ng/L |
No.5 standard |
diluant original de la norme 120μl + de la norme 120μl |
| 3200ng/L |
No.4 standard |
120μl standard diluant de la norme No.5 + 120μl |
| 1600ng/L |
No.3 standard |
120μl standard diluant de la norme No.4 + 120μl |
| 800ng/L |
No.2 standard |
120μl standard diluant de la norme No.3 + 120μl |
| 400ng/L |
No.1 standard |
120μl standard diluant de la norme No.2 + 120μl |
| Concentration standard |
No.5 standard |
No.4 standard |
No.3 standard |
No.2 standard |
No.1 standard |
| 12800ng/L |
6400ng/L |
3200ng/L |
1600ng/L |
800ng/L |
400ng/L |
Tampon 20ml dilué de lavage du concentré 30x de tampon de lavage dans désionisé ou eau distillée pour rapporter 500 ml de tampon du lavage 1x. Si les cristaux ont formé dans le concentré, mélange doucement jusqu'à ce que les cristaux se soient complètement dissous.
Calcul de résultat
Construisez une courbe standard en traçant l'OD moyen pour chacun standard sur (y) l'axe vertical contre la concentration sur (x) l'axe horizontal et dessinez une courbe de l'ajustement normal par les points sur le graphique. Ces calculs peuvent mieux être exécutés avec le logiciel sur ordinateur de courbe-montage et la ligne de l'ajustement normal peut être déterminée par analyse de régression.
Références
Ariyasu H., Takaya K., Hosoda H., Iwakura H., Ebihara K., Mori K., Ogawa Y., Hosoda K., Akamizu T., Kojima M., Kangawa K., Nakao K.
Endocrinologie 143:3341- 3350(2002)
