Les kits forts d'essai d'immunoessai de la sensibilité BFGF ont adapté 2 aux besoins du client - 8°C le stockage ISO9001

Kit fort d'essai d'immunoessais de sensibilité et de spécificité BFGF de rat adapté aux besoins du client avec 2 heures de temps d'analyse

Ra de Cat.No E0341

Chaîne standard de courbe : 2ng/L - 600ng/L

Sensibilité : 1.16ng/L

le produit de *This sert pour l'usage de recherches seulement, pas des procédures de diagnostic. Il est recommandent fortement de lire cette instruction entièrement avant emploi.

Réactif fourni

Matériel requis mais non assuré

• Incubateur 37°C±0.5°C
• Papier absorbant
• Pipettes de précision et astuces jetables de pipette
• Nettoyez les tubes
• Désionisé ou eau distillée
• Lecteur de Microplate avec 450 le filtre de longueur d'onde du ± 10nm

Utilisation prévue

Ce kit de sandwich est pour la détection quantitative précise du facteur de croissance de base de fibroblaste de rat (également connu sous le nom de BFGF) en sérum, plasma, surnageants de culture cellulaire, lysates de cellules, homogénats de tissu.

Principe d'analyse

Ce kit de sandwich est une analyse Enzyme-liée d'immunosorbant (ELISA). Le plat a été enduit d'un préenduisage avec de l'anticorps du rat BFGF. BFGF présentent dans l'échantillon sont ajoutés et lient aux anticorps enduits sur les puits. Et l'anticorps alors biotinylated du rat BFGF est ajouté et lie à BFGF dans l'échantillon. Alors Streptavidin-HRP est ajouté et lie à l'anticorps de Biotinylated BFGF. Après incubation Streptavidin-HRP défait est enlevé pendant une étape de lavage. La solution de substrat est alors ajoutée et la couleur se développe proportionnellement à la quantité du rat BFGF. La réaction est terminée par l'addition d'acide arrêtent la solution et l'absorbance est mesurée à 450 nanomètre.

Précautions

• Avant l'utilisation, le kit et l'échantillon de sandwich devraient être chauffés naturellement à la température ambiante 30 minutes.
• Cette instruction doit être strictement suivie dans l'expérience.
• Une fois que le nombre désiré de bandes a été enlevé, rescellez immédiatement le sac pour protéger le rester contre la détérioration. Couvrez tous les réactifs si non utilisable.
• Make sure introduisant à la pipette l'ordre et le taux d'addition de bien-à-bien en introduisant à la pipette des réactifs.
• Les astuces de pipette et le scelleur de plat à disposition devraient être propres et jetables pour éviter la contamination transversale.
• Évitez d'employer les réactifs de différents groupes ensemble.
• La solution B de substrat est sensible à la lumière, n'exposent pas la solution B de substrat pour s'allumer pendant longtemps.
• Arrêtez la solution contient l'acide. Veuillez porter l'oeil, la main et la protection de la peau en employant ce matériel. Évitez le contact de la peau ou des muqueuses avec du réactif de kit.
• Le kit de sandwich ne devrait pas être employé au delà de la date d'échéance.

Préparation de réactif

Tous les réactifs devraient être apportés à la température ambiante avant emploi.

La norme reconstituent le 120μl de la norme (640ng/L) avec 120μl du diluant standard pour produire d'une solution d'action standard 320ng/L. Permettez à la norme de se reposer pendant 15 minutes avec l'agitation douce avant de faire des dilutions. Préparez les points standard en double en diluant en série la solution d'action standard (320ng/L) 1:2 avec le diluant standard pour produire solutions 160ng/L, 80ng/L, 40ng/L et 20ng/L. Le diluant standard sert de norme zéro (0 ng/L). Toute solution restante devrait être gelée à -20°C et être employée dans un délai d'un mois. La dilution des solutions étalons suggérées sont comme suit :

Tampon 20ml dilué de lavage du concentré 25x de tampon de lavage dans désionisé ou eau distillée pour rapporter 500 ml de tampon du lavage 1x. Si les cristaux ont formé dans le concentré, mélange doucement jusqu'à ce que les cristaux se soient complètement dissous.

Procédure d'analyse

1. Préparez tous les réactifs, solutions étalons et échantillons comme instruits. Apportez tous les réactifs à la température ambiante avant emploi. L'analyse est exécutée à la température ambiante.

2. Déterminez le nombre de bandes requises pour l'analyse. Insérez les bandes dans les cadres pour l'usage. Les bandes inutilisées devraient être stockées à 2-8°C.

3. Ajoutez la norme 50μl à la norme bien. Note : N'ajoutez pas l'anticorps à la norme bien parce que la solution étalon contient l'anticorps biotinylated.

4. Ajoutez l'échantillon 40μl aux puits témoin et puis ajoutez l'anti-BFGF anticorps 10μl aux puits témoin, puis ajoutez le streptavidin-HRP 50μl aux puits témoin et aux puits standard (puits de contrôle non vide). Mélangez bien. Couvrez le plat de scelleur. Incubez 60 minutes à 37°C.

5. Enlevez le scelleur et lavez le plat 5 fois avec le tampon de lavage. Imbibez de les puits au moins le tampon de lavage de 0,35 ml pour 30 secondes à 1 minute pour chaque Washington. Pour le lavage automatisé, aspirez tous les puits et lavez 5 fois avec le tampon de lavage, remplissant au-dessus du niveau jaillit avec le tampon de lavage. Épongez le plat sur les serviettes de papier ou tout autre matériel absorbant.

6. Ajoutez la solution A du substrat 50μl à chacun puits et puis ajoutez la solution B du substrat 50μl à chacun bien. Incubez le plat couvert de nouveau scelleur pendant 10 minutes à 37°C dans l'obscurité.

7. Ajoutez 50μl arrêtent la solution à chacun bien, la couleur bleue changera en jaune immédiatement.

8. Déterminez la densité optique (valeur d'OD) de chacun puits immédiatement utilisant un ensemble de lecteur de microplate à 450 nanomètre à moins de 10 menuets après avoir ajouté la solution d'arrêt.